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目的:课题组前期研究表明,胃癌间质干细胞(gastric cancer mesenchymal stem cells,GC-MSCs)能通过旁分泌作用促进胃癌进展,并且GC-MSCs较骨髓MSCs(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)高分泌肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)。HGF已被发现在多种肿瘤中异常表达,且与肿瘤的增殖、转移及血管形成相关。因此本研究旨在探讨GC-MSCs来源的HGF在胃癌细胞增殖、迁移及肿瘤形成中的作用,以及对肿瘤细胞程序性死亡受体-配体1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)表达的影响。方法:采用组织贴壁法从胃癌患者肿瘤组织和健康人骨髓中原代分离培养GC-MSCs和BM-MSCs并收集其细胞培养上清(culture medium of GC-MSCs,GC-MSCs-CM,culture medium of BM-MSCs,BM-MSCs-CM),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测GC-MSCs-CM和BM-MSCs-CM中HGF水平。利用HGF中和抗体中和上清中的HGF后作用于胃癌细胞株(SGC-7901和/或MGC-803),采用CCK8实验检测胃癌细胞增殖活性,克隆形成实验检测胃癌细胞克隆形成能力,Transwell和细胞划痕实验检测胃癌细胞迁移能力,Western-blotting检测胃癌细胞增殖和迁移相关蛋白表达水平,Western-blotting和流式细胞术检测胃癌细胞PD-L1表达水平。为了在体内验证HGF对胃癌的影响,构建BALB/c裸鼠皮下成瘤模型,观察体内肿瘤形成情况,并通过Western-blotting检测肿瘤组织中PD-L1表达水平。用外源性HGF处理胃癌细胞,利用CCK8、流式细胞术及Western-blotting进一步证实HGF对胃癌细胞增殖及PD-L1表达的作用。ELISA检测健康人及胃癌患者血清中HGF水平,Kmplot数据库分析HGF m RNA表达与胃癌患者总体生存率的关系,免疫组织化学染色(IHC)观察胃癌患者组织中HGF表达水平。结果:GC-MSCs-CM中的HGF含量明显高于BM-MSCs-CM(P<0.05)。GC-MSCs-CM能够促进胃癌细胞增殖、迁移及克隆形成,并上调增殖和迁移相关蛋白表达,这种促进作用能被HGF中和抗体明显抑制。GC-MSCs-CM体外明显促进胃癌细胞PD-L1表达,且能被HGF中和抗体抑制。GC-MSCs-CM体内促进小鼠肿瘤生长,并增强肿瘤组织PD-L1表达,使用HGF中和抗体后以上促进作用被明显抑制。外源性HGF能够促进胃癌细胞增殖、上调胃癌细胞PD-L1表达。临床胃癌患者血清HGF含量明显高于健康人血清HGF水平(P<0.05),HGF m RNA高表达患者总体生存率较低,PD-L1表达阳性患者肿瘤组织HGF表达阳性率较高。结论:GC-MSCs-CM来源的HGF在促胃癌细胞增殖、迁移、克隆形成以及PD-L1表达和肿瘤生长中发挥重要作用,可能是GC-MSCs-CM调控胃癌细胞PD-L1高表达进而促进胃癌进展的关键因子,其有望成为胃癌防治的潜在分子靶标。