富氢水对种植体周围炎症影响的初步探究

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研究背景:近年来,越来越多的报道表明,作为一种新型抗氧化剂,氢对短暂性脑缺血、新生儿脑低氧缺血、冷缺血再灌注损伤以及异体心脏和主动脉受体炎症相关性恶化等器官损伤具有保护作用。氢分子是一种新兴的治疗性医疗气体,可用于包括帕金森病、糖尿病、骨质疏松症等一些退行性疾病的治疗。据报道,在高血压大鼠中,注射富氢生理盐水可减轻左心室肥厚和血管功能障碍。目前主要有吸入氢气法、注射富氢盐水法和饮用富氢水法作为常见处理方法。与氢气相比,富含氢的盐水和水更为安全、经济、容易获得。在牙科中,动物研究表明,富氢水(HW Hydrogen-Rich Water)可以减轻老化和牙周病引起的牙龈氧化应激。最近的一项研究也显示,饮用HW激活了抗氧化防御的基因表达,有助于促进大鼠口腔黏膜创面的愈合。牙龈氧化应激参与了牙槽骨吸收的进程。研究表明大鼠通过饮用HW抑制肥胖可通过限制牙龈氧化应激减轻牙槽骨吸收。研究目的:通过富氢水滴定实验确定制备出富氢水后其最适浓度时间范围;建立比格犬下颌骨种植体周围炎症模型,测定富氢水对植体周软、硬组织炎症的抑制作用;通过对样本内RNA测序探究在富氢水的作用下细菌含量的变化。材料与方法:(1)种植体周围炎模型的建立:三只比格犬双侧下颌第一、第二、第三、第四前磨牙拔牙后即刻种植,三个月后行二期手术,上愈合基台,同期放入细丝线结扎,之后每隔两周用牙周探针对植体沟内出血、溢脓及探诊深度测定及X线片观察验证是否建模成功(2)对饱和富氢水不同时间内氢离子浓度的测定:机器制备出饱和富氢水,分别在放置不同时间段后,将富氢水滴定液滴入,计算出其浓度,从而得出最适宜的实验时间。富氢水、去离子水每日两次分别冲洗植体周围,每两周测定植体牙龈指数(GI),改良出血指数(mSBI),探诊深度(PD)平均值,同时提取龈沟液(3)用ELISA试剂盒测定IL-1,IL-6,MMPs的表达变化梯度;处死比格犬后,PCR检测植体周骨组织内两组中IL-1,IL-6,MMPs的表达;HE染色观察两组中验证分布趋势(4)取第六周植体周龈沟液,PCR扩增,16SRNA测序,生信分析,检测两组内细菌差异结果:(1)6周后,临床观察得出植体周软组织出血、溢浓,且探诊达5 mm以上,X线片示牙槽骨角型吸收。(2)三次富氢水滴定实验得出最适浓度时间范围在制备出富氢水后的5 min内;实验第0周、第2周、第4周和第6周对植体周临床指标(GI、mSBI、PD)进行测量得出实验组中各项临床指标均有下降,但与对照组无统计学意义,(3)使用ELISA试剂盒对炎症因子(IL-1、IL-6、MMPs)定量分析得出实验组与对照组有明显差异(P≤0.01),尤其在前两周内实验组炎症因子下降趋势较为显著;HE染色结果得出实验组与对照组相比炎症细胞有减小趋势。对样品内骨组织PCR测定,对照组中IL-1、IL-6和MMPs的表达量显著高于实验组,测得结果且有统计学意义。(4)龈沟液内16SRNA测序得出实验组相较对照组中,卟啉单胞菌属,梭杆菌属等致病菌含量降低,且P≤0.01。结论:(1)富氢水机,采用固体聚合物质子交换纯水电解技术制备富氢水,应现用现制备;(2)细丝线结扎法加高糖软食喂养诱导实验性种植体周围炎可成功建立种植体周围炎症模型;(3)富氢水对实验性种植体周围炎症的进展有抑制作用
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