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目 的:胰腺癌因其进展迅速、易转移已成为预后最差的消化系统肿瘤。特异性核基质蛋白1(SATB1)在多种实体肿瘤中呈高表达水平,与肿瘤预后相关。既往研究发现SATB1通过调控下游基因表达,促进胰腺癌生长、侵袭。CXC趋化因子家族成员,趋化因子-1(CXCL1)和趋化因子-8(CXCL8),通过促进细胞增殖、侵袭和转移,不仅参与多种肿瘤形成,还介导肿瘤血管生成的调节。本文将探讨CXCL1、8在胰腺癌发生发展中的作用,为趋化因子在胰腺癌诊断与治疗中的应用提供理论基础。方法:1、应用Microarray技术和维恩分析检测并筛选出受SATB1调控的目的基因,并应用Real-time PCR检测SATB1对目的基因表达的影响。应用GEPIA在线数据库分析目的基因在胰腺癌患者癌与癌旁组织中的表达水平以及与胰腺癌患者病理分期、预后的关系。2、应用shRNA慢病毒干扰胰腺癌细胞株CXCL1和CXCL8基因表达,并挑选干扰效率较高的3号和4号位点的胰腺癌细胞株进行后续深入实验。通过MTT比色法、平板克隆试验、划痕试验、细胞黏附试验等体外功能试验,检测胰腺癌细胞的增殖、迁移、黏附能力。3、应用胰腺癌细胞株悬液注射于裸鼠皮下制作异位移植瘤模型。应用免疫组化检测胰腺癌细胞的Ki67、CD34蛋白的表达。4、应用干扰CXCL1和CXCL8基因表达的3号和4号位点的胰腺癌细胞株上清液制备肿瘤条件培养基(tumorconditionedmedium,TCM),应用TCM处理人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs),通过 MTT 比色法和划痕试验检测TCM对HUVECs增殖和迁移能力的影响。5、应用Microarray技术和维恩分析检测并筛选出差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),应用生物信息学分析DEGs的基因功能及其潜在机制。结 果:1、SATB1作为CXCL1和CXCL8的上游基因调控其表达,具体表现为SATB1上调CXCL1、CXCL8的表达。CXCL1、8在胰腺癌患者肿瘤组织中的表达水平较正常组织明显升高,且表达水平与胰腺癌患者的病理分期相关。高表达CXCL8的胰腺癌患者的无病生存时间明显下降,而CXCL1的表达水平对胰腺癌患者的无病生存时间无明显影响。2、体内和体外实验表明干扰CXCL1和CXCL8在PANC-1细胞中的表达后,PANC-1细胞的增殖、迁移能力下降。3、免疫组化结果显示干扰CXCL1和CXCL8后,Ki67和CD34表达水平下降,表明干扰CXCL1和CXCL8影响胰腺癌肿瘤形成,血管生成。4、MTT 比色法和划痕实验结果表明经TCM处理后,HUVECs的增殖和迁移能力下降。5、Microarray技术和维恩分析找出在HUVECs中干扰CXCL1表达组与对照组,干扰CXCL8表达组与过表达CXCL8组的DEGs。GO(gene oncology)分析结果显示,DEGs主要富集在信号转导,细胞生长与凋亡,细胞通讯等细胞功能。KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路富集分析中,DEGs 多富集在 PI3k-Akt、cGMP-PKG、MAPK 等信号通路;蛋白质互作(protein-protein interaction,PPI)网络显示,与CXCL1相关的DEGs中,关键节点基因RBBP7上调,YBX1下调。与CXCL8相关的DEGs中,关键节点基因CD44、FOXM1、GATA3上调,CXCL10基因下调。结 论:SATB1通过上调下游基因CXCL1、CXCL8的表达,提高胰腺癌细胞的增殖、迁移能力,参与胰腺癌的血管生成,从而参与了胰腺癌的发生发展。这为趋化因子CXCL1、CXCL8在胰腺癌的临床应用提供了一定的理论依据。