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背景:系统性硬化症（Systemic Sclerosis,SSc）是一种以广泛血管功能障碍以及皮肤和内脏器官进行性纤维化为特征的全身性自身免疫性疾病,其患病率低,但致死、致残率高,临床表现多样,发病机制尚未完全阐明,也缺乏特异有效的治疗方法。目前血管病变、细胞免疫系统激活和组织纤维化被认为是SSc发病主要的三个机制。周细胞存在于微血管壁并有间充质干细胞潜能,它能调节血管的新生和维持血管稳定,也可能转化为肌成纤维细胞,有促纤维化作用。周细胞可能同时参与了SSc血管病变及纤维化的两种发病过程。Wnt/β-catenin信号通路是一个在进化上高度保守的信号系统,在胚胎发育、维持器官及组织稳态方面,发挥了至关重要的作用。已知增强的经典Wnt信号传导可能在纤维化疾病中发挥重要致病作用,有可能参与调节周细胞-内皮细胞的相互作用。因此,研究Wnt/β-catenin信号通路对周细胞功能紊乱的影响,并对其作用机制进行探索,可能为SSc的治疗提供新的靶点。目的:围绕Wnt/β-Catenin信号通路在系统性硬化症小鼠中介导周细胞功能紊乱的作用开展研究,为系统性硬化症的治疗提供新的靶点。方法:取18只Balb/C小鼠,随机分成3组,分别为模型组、干预组和空白对照组,每组6只小鼠。空白对照组每日背部皮下注射PBS 100μL。模型组及干预组每日背部皮下注射100μL BLM（浓度1 mg/m L）。干预组每周腹腔注射1次200μL i CRT3（浓度10 mg/kg）。皮下注射给药持续4周,每日观察小鼠皮下注射部位皮肤变化并监测小鼠体重变化。待造模完成后处死小鼠,对皮肤和肺部HE染色、Masson染色、免疫组化及免疫荧光染色进行组织学观察。通过Western Blot（WB）检测皮肤和肺组织Wnt1、β-catenin、α-SMA和Col1α1蛋白表达情况。从各组小鼠肺部提取周细胞培养,取第3代原代细胞通过免疫荧光（NG2、PDGFRβ、CD31）和WB检测PDGFRβ、CD31蛋白表达行细胞鉴定。通过WB检测三组周细胞Wnt1、β-catenin、α-SMA和Col1α1蛋白表达情况。对三组周细胞行CCK8实验检测增殖情况,行细胞划痕和Transwell实验检测其迁移能力,行血管生成实验检测其成管能力。结果:（1）模型组小鼠经BLM诱导28天后背部皮肤变紧变硬,毛发很难生长;干预组小鼠皮肤稍紧硬,仍能生长毛发;空白对照组皮肤柔软。（2）HE及Masson染色,模型组小鼠皮肤皮下胶原增生、脂肪及附属器减少,空白对照组皮肤无明显增厚,干预组皮肤改变介于两者之间。皮肤和肺免疫组化染色,模型组小鼠皮肤和肺中α-SMA表达量明显增加,干预组较模型组减少（P＜0.05）,与空白对照组相比无统计学差异。三组小鼠皮肤及肺组织进行免疫荧光染色也呈现出同样的趋势。（3）WB检测提示SSc小鼠皮肤和肺中Wnt1和β-catenin蛋白表达量最高,干预组Wnt1和β-catenin表达量下降,较模型组均有显著差异,空白对照组最低,两种蛋白的表达较干预组均有显著差异。三组小鼠皮肤和肺中α-SMA和Col1α1蛋白表达,其中两种蛋白的表达量以模型组最高,干预组次之,空白对照组最低,三组间均有显著差异。（4）三组小鼠肺周细胞提取培养后镜下观察,周细胞贴壁生长,细胞体积较内皮细胞大,呈梭形、星形,经免疫荧光染色,NG2和PDGFRβ阳性,CD31阴性。WB检测肺提取的周细胞PDGFRβ阳性表达,CD31无表达。（5）WB检测周细胞表达Wnt1,模型组高于干预组（P＜0.05）,干预组较空白对照组无差异。β-catenin蛋白表达以模型组最高,干预组次之,空白对照组最低,三组间均有显著差异。三组周细胞α-SMA和Col1α1蛋白表达,其中两种蛋白的表达量以模型组最高,干预组次之,空白对照组最低,三组间均有显著差异。（6）CCK8检测三组周细胞增殖情况,模型组增殖最慢,较干预组有显著差异,干预组增殖速度较模型组有所改善,但仍低于空白对照组（P＜0.05）。（7）划痕实验显示模型组周细胞迁移能力最差,干预组较模型组迁移能力有所改善（P＜0.05）,较空白对照组迁移力无统计学差异。（8）迁移实验显示在健康内皮细胞作用下,模型组周细胞的迁移数量最少,低于干预组迁移数量（P＜0.05）,干预组周细胞的迁移数量与空白对照组无显著差异。（9）血管生成实验中,模型组形成小管的branch points较干预组低（P＜0.05）,而干预组又较空白对照组低（P＜0.05）;模型组形成小管的长度也较干预组少（P＜0.05）,而干预组又较空白对照组低（P＜0.05）。结论:（1）SSc小鼠皮肤和肺组织中Wnt通路蛋白表达上调,纤维化相关蛋白α-SMA和Col1α1表达量增加,Wnt通路抑制后α-SMA和Col1α1蛋白含量减少。（2）从小鼠肺组织提取的周细胞中Wnt通路蛋白表达与皮肤和肺组织的蛋白表达趋势一致,通过抑制Wnt通路,周细胞迁移能力、成管能力均有所改善,α-SMA和Col1α1蛋白的表达下降。（3）在SSc小鼠中,周细胞相对于内皮细胞作用的功能缺陷可能是血管生成失败或减少的主要原因,同时周细胞很可能也参与了胶原沉积致组织纤维化的病理过程,并且这两个过程中周细胞受到了Wnt通路的调控。