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目的:研究儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的Netrin-1蛋白的表达水平和其与临床指标的相关性,并探讨Netrin-1调控ALL细胞的潜在机制。方法:采用ELISA法检测48例ALL患儿和27例非肿瘤疾病对照患儿外周血血清中的Netrin-1水平,比较疾病组和对照组患儿的血清Netrin-1水平并分析Netrin-1水平与ALL临床指标的相关性。体外培养人白血病细胞株:Jurkat、Molt-4、SUP-B15和Raji,经不同浓度(0~200 ng/ml)Netrin-1蛋白处理后,采用Transwell法检测各组细胞的侵袭能力;采用CCK8法检测各组细胞增殖的能力;采用Western blot检测各组细胞内FAK、ERK1/2、PI3K、AKT信号通路关键蛋白的磷酸化水平。结果:ALL患儿血清中的Netrin-1表达水平显著高于对照组(P<0.05)。Netrin-1表达水平与外周血白细胞(WBC)水平和外周血血小板(PLT)水平呈显著相关:随着Netrin-1表达水平升高,WBC水平总体(r=-0.290,P<0.05)呈下降趋势,PLT水平(r=0.483,P<0.05)呈上升趋势,但当Netrin-1浓度处于25~50 ng/ml水平时,Netrin-1水平与WBC(r=0.886,P<0.05)呈正相关;WBC大于50×10~9/L和PLT小于20×10~9/L时,患儿的Netrin-1表达水平均处于25~50 ng/ml,呈显著降低(P=0.042,P=0.001);Netrin-1表达水平与年龄、Hb、骨髓幼稚细胞无显著相关性。危险度分级中,高危组中的Netrin-1表达水平显著增高,具有显著性差异(P=0.017);Netrin-1表达水平在MRD、中枢神经浸润、遗传学异常等分组中的无显著性差异。Transwell实验结果表明,Netrin-1促进4种白血病细胞株的侵袭能力(P<0.05):随着Netrin-1浓度增高,侵袭下室的细胞数有先增加后降低的趋势;4种细胞均在Netrin-1浓度为100 ng/ml时,侵袭下室的细胞数最高。不同浓度Netrin-1对细胞增殖的影响不同:4种细胞存活率均表现为低浓度升高及高浓度降低的趋势;Netrin-1浓度为25 ng/ml时,细胞存活率均较无Netrin-1添加状态显著增加(P<0.05),其中SUP-B15细胞在浓度为100 ng/ml时,细胞存活率最高。Netrin-1使FAK、Erk1/2、PI3K(P85/55)、Akt信号通路关键分子磷酸化水平显著上升(P<0.05)。结论:Netrin-1在儿童ALL中存在异常的表达;不同的Netrin-1表达水平与临床指标的关系不同,提示不同浓度Netrin-1水平可能对患儿的影响不同;Netrin-1可能通过激活MAPK信号通路与PI3K信号通路来促进白血病细胞的增殖、侵袭能力进而影响ALL的发生发展,但其在不同浓度区间呈现差异的影响效果,提示Netrin-1依据自身浓度差异可能具有不同的调控机制。