论文部分内容阅读
目的:观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)和高糖对人脐静脉内皮细胞-12细胞株(HUVEC-12) LOX-1和IL-1β表达的影响,以及PPARγ激动剂ciglitazone对ox-LDL和高糖诱导的LOX-1表达的影响。方法:分别用不同浓度的ox-LDL(0、20、40、80μg/ml)和不同浓度的葡萄糖(0、5.6、11.2、22.4、44.8mmol/L及甘露醇对照组)与HUVEC-12共同孵育24h,然后将ox-LDL和22.4mmol/L葡萄糖与HUVEC-12共孵育24小时,用RT-PCR、流式细胞仪分别检测细胞中LOX-1 mRNA和蛋白质的表达;用RT-PCR检测细胞IL-1βmRNA的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测细胞培养液中IL-1β的分泌量。分别用40μg/ml的ox-LDL和22.4mmol/L高糖加入10μmol/L的PPARγ激动剂ciglitazone共孵育HUVEC-12细胞24小时,用RT-PCR和Western blot分别检测细胞中LOX-1 mRNA和蛋白质的表达。结果:随着ox-LDL和D-葡萄糖浓度的增加,LOX-1 mRNA和蛋白质的表达逐渐增加,IL-1βmRNA的表达和分泌量也逐渐增加。用40μg/ml的ox-LDL和22.4mmol/L的高糖共孵育HUVEC-12细胞24小时后,LOX-1和IL-1β的表达也是上调的。用10 ng/ml的IL-1β处理HUVEC-12细胞24小时后,与空白对照组相比,LOX-1 mRNA和蛋白质的表达也是增加的。分别用40μg/ml的ox-LDL和22.4mmol/L高糖加入10μmol/L的ciglitazone共同孵育HUVEC-12细胞24小时后,同空白对照组相比, ciglitazone可以降低ox-LDL和高糖诱导的LOX-1的表达。结论: Ox-LDL和高糖呈剂量依赖性增加人脐静脉内皮细胞LOX-1和IL-1β的表达水平;IL-1β也可上调人脐静脉内皮细胞LOX-1的表达;PPARγ激动剂ciglitazone可以降低ox-LDL和高糖诱导的LOX-1的表达。