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目的应用改良Kestenbaum手术对先天性眼球震颤(congenital nystagmus,CN)患者进行手术治疗,以消除其代偿头位和改善视功能。观察CN患者术中被切除眼外肌的超微结构,探讨CN患者眼外肌超微结构改变与CN发生的关系。通过连锁分析方法对两个中国X-连锁显性遗传CN家系进行基因定位,并对相关致病基因FRMD7进行序列分析,以发现其突变位点,明确FRMD7基因突变与CN发病的关系。方法1.改良Kestenbaum手术治疗方法1.1对CN患者进行详细的临床检查,包括视力、屈光、眼前段、眼底、眼位、眼球运动、头位扭转角度和三棱镜耐受试验。1.2对头位扭转角度为25°～30°的患者,采用Parks5-6-7-8手术设计量,30°以上的患者调整扩大手术量。2.眼外肌超微结构研究方法对CN患者术中切除的眼外肌进行光镜和透射电镜检查,正常对照选自因眼外伤需行眼球摘除且无眼球运动障碍患者的眼外肌。3.分子遗传学研究方法3.1取家系成员外周血5～8ml,采用Roche Biochemical公司的DNA分离试剂盒提取基因组DNA。3.2基因连锁分析选取X染色体上Xq25-q27区间内具有高杂合度的微卫星标记物,对全部荧光标记的微卫星引物进行聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR),在ABI3 130-avant全自动遗传分析仪上读取微卫星标记物的等位基因片断大小,应用GeneMapper 3.7软件进行单体型结构分析,LINKAGE5.1软件进行两点法计算LOD值并构建单体型。3.3基因序列分析对2个家系全部患病成员进行FRMD7基因序列分析,12个外显子的PCR扩增产物在ABI3 130-avant全自动遗传分析仪上进行直接测序。如发现基因突变,在120名正常男性中进行筛查。结果1.临床研究:5例CN患者行改良Kestenbaum手术后代偿头位消失,正前方双眼视力较术前平均提高0.32行,未出现斜视。2.眼外肌超微结构研究:CN患者眼外肌肌原纤维排列紊乱,其平行结构发生错乱,邻近的肌原纤维相互交织;线粒体肿胀,部分线粒体嵴断裂、消失呈空泡样改变;眼外肌内胶原纤维增生。眼外肌本体感受器外囊层部分断裂、不连续,电子密度不均匀;囊内雪旺细胞胞核不规则,有髓神经纤维髓鞘板层分离,轴突内线粒体肿胀、嵴断裂,有髓样体结构形成;损伤严重时雪旺细胞核呈坏死状,囊内神经成分溶解消失,细胞器成分明显减少。3.分子遗传学研究:经两点法连锁分析,两个家系的致病基因均与DXS1047紧密连锁,HU家系的致病基因定位在DXS8059和DXS8033之间,LI家系的致病基因定位于DXS8044和DXS1227之间。两个家系的基因座在DXS8044和DXS8033之间相互重叠,所以CN的致病基因定位在Xq25-26.3上DXS8044和DXS8033之间约4cM内。基因序列分析发现HU家系FRMD7基因第9外显子存在812G＞T的杂合性基因突变,LI家系FRMD7基因第8外显子存在第689-690碱基AG的缺失,120名正常男性对照未检测到这两种突变。结论1.改良Kestenbaum手术对消除CN患者的代偿头位和提高正前方视力是有效安全的。2.CN患者眼外肌及本体感受器的超微结构均有明显改变,这些改变可能与CN的病因或发病机制有关。3.将X-连锁显性遗传CN的基因座由4.4cM缩小到4cM,定位于X染色体长臂Xq25-26.3 DXS8044和DXS8033之间。4.致病基因FRMD7突变:812G＞T和689-690delAG为首次报道的新突变体。