鸡新城疫—慢性呼吸道病二联油乳剂灭活疫苗的研制

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鸡败血支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)是一种广泛存在而危害严重的鸡呼吸道传染病,感染后可影响鸡的产肉和产蛋率下降,并能并发和继发其他疫病。它给养鸡业造成了严重的经济损失。非典型新城疫(Newcastle disease,ND)和MG混合感染的情况占了很大比重。同时,NDV和MG的活苗在使用时常出现干扰。我国鸡群呼吸道中普遍存在MG感染,而造成如:NDV弱毒疫苗的免疫效率低下以及加重了经呼吸道途径免疫的各种疫苗的副作用。基于我国临床实际遇到的问题,我国目前迫切需要使用联苗进行鸡群呼吸道综合征的综合防治。本研究着重研制能够实现同时控制ND和MG感染的新型二联油乳剂灭活疫苗。这将对ND和MG的有效控制具有重要的实践意义。本研究引进的La Sota株,经复壮后能在鸡胚良好繁殖,在鸡胚中连传5代,鸡胚液中HA滴度均达1:512以上,EID50达109.5以上,说明毒株稳定。从对该毒株系统鉴定的结果看,其脑内接种致病指数(ICPI)、对鸡胚平均死亡时间(MDT)、对鸡胚毒力、红细胞凝集价、病毒含量、安全性、免疫原性、特异性等都符合ND低毒力活疫苗株的要求。通过透射电镜观察灭活前后的NDV病毒粒子,灭活前后病毒粒子基本形态无明显差异。本研究引进的MG中等强毒株S6经无细胞培养基传代后,CFU达5×109以上。经固体培养、凝集试验、血凝试验、免疫荧光试验、Western-blot和透射电镜检测、致病性试验、免疫原性鉴定,结果表明:S6毒株符合中等强毒株特征,适合用于MG疫苗株。上述各代次种子液经纯净性检验,均无其他微生物污染,可用于疫苗种毒使用。用经鉴定的La Sota毒种接种SPF鸡胚,收获尿囊液,0.1%甲醛灭活后制得La Sota毒株抗原;用S6毒株在增菌培养基中培养72h,计数后,用0.2%甲醛进行灭活。按一定的生产工艺方法乳化,制成ND-MG二联油乳剂灭活疫苗。在SPF鸡群中使用该二联苗后2个月内,试验鸡群均处于健康状态,且试验组体重明显比攻毒组高,抗体滴度一直维持在保护效价以上;攻毒后,剖检结果显示:MG单苗的气囊保护率为95%,而ND-MG二联苗的气囊保护率为98%,而对NDV的攻毒保护率,ND单苗和ND-MG二联苗均为100%。
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