论文部分内容阅读
土壤次生盐渍化是温室蔬菜生长中的主要障碍之一，严重制约设施蔬菜的可持续发展。黄瓜（Cucumis sativusL.）是中国设施栽培的主要蔬菜作物之一，属盐敏感植物，在种植过程中经常遇到盐害等逆境胁迫。已有研究表明，PLD信号转导途径与MAPK级联信号转导途径在响应逆境信号中存在关联性，故本文以NaCl模拟盐胁迫，研究黄瓜CsPLDα和CsNMAPK基因对盐胁迫的响应机制，为丰富黄瓜耐盐机理和创制抗盐黄瓜新种质提供理论依据。主要研究结果如下： 1.经100mM NaCl处理后，黄瓜幼苗叶片中CsPLDα和CsNMAPK表达量、蛋白表达量及酶活性分别在处理1h和3h达最大值；磷脂酸（PA）含量呈先升高后降低趋势，在处理3h后达较高值；一氧化氮（NO）含量在处理1h后比0h略有升高，但其他处理时间均低于0h；可溶性蛋白和丙二醛含量分别在处理3h和1h后达较高值。以上结果表明，CsPLDα和CsNMAPK基因均能响应盐胁迫，且CsPLDα响应早于CsNMAPK。 2.正常生长条件下，除拟南芥突变体mpk3发芽率稍低；野生型（WT）、突变体pldα1、互补株系MC和PC、过量表达CsPLDα株系（OE-1和OE-2）、过量表达CsNMAPK株系（OE-3和OE-10）和共表达CsPLDα和CsNMAPK株系（COE-17和COE-41）发芽率无显著差异。100mM和150mM NaCl处理下，WT发芽率显著降低；pldα1和mpk3发芽率显著低于WT；而互补株系MC和PC发芽率高于WT，但差异不显著；过量表达株系与PC、MC无显著差异；COE株系比OE稍高。表明CsPLDα和CsNMAPK基因共表达可提高拟南芥种子的抗盐性。 3.正常生长条件下（0h），过量表达CsPLDα黄瓜株系（P+）、过量表达CsNMAPK黄瓜株系（M+）和共表达CsPLDα和CsNMAPK株系（P+M+）中CsPLDα和CsNMAPK表达量均显著高于野生型黄瓜（WT），而抑制表达CsPLDα黄瓜株系（P-）和抑制表达CsNMAPK黄瓜株系（M-）中二者表达量均显著低于WT；M+和P+M+中膜磷脂种类及组分均高于WT，P+中PE、PS和PA含量均高于WT；P+M+中ABA、SA和GA含量均高于WT，JA含量低于WT。 4.盐胁迫下，WT、P+、M+、P-、M-和P+M+中CsPLDα表达量在1h后达最大，CsNMAPK表达量在3h后达最大，且P+、M+和P+M+中CsPLDα和CsNMAPK表达量分别显著高于P-和M-。随处理时间延长，P+中总DGDG、MGDG、PG、PC和PE含量呈升高趋势，WT、P+、P-、M+、M-和P+M+中PA含量均呈先降低后升高趋势，PA中所有组分34∶3、36∶6、36∶5和36∶3均有升高趋势；P+、P-、M+、M-和P+M+中ABA、GA和JA含量均有所升高，SA含量降低。处理1h和3h后，P+中PA含量均低于P-，M+中其含量均显著高于M-；处理1h后，P+M+中其含量比P+显著升高，比M+降低；处理3h后，P+M+中其含量均比P+和M+降低。处理1h后，P+M+中ABA含量比P+显著升高，与M+无显著差异，处理3h后，P+M+中其含量比P+显著升高，比M+显著降低。