在水产饲料粮食型蛋白短缺的背景下,评价黄粉虫在草鱼养殖中的效果可以增加草鱼饲料中的候选蛋白源,并为开发其他蛋白源提供指导。豆粕是草鱼饲料中主要的粮食型蛋白源之一,进一步精确草鱼对豆粕蛋白的需求量和探究豆粕蛋白质水平对肌肉生长、健康的影响可减少不必要的浪费并提高养殖效益。因此,本实验旨在确定草鱼对豆粕的蛋白需求和评估黄粉虫作为草鱼饲料蛋白源的可行性,以及蛋白质水平对改善草鱼肉质和提高抗病能力的作用。本实验设计框架如下:以初始体重为6.80±0.10g的草鱼幼鱼进行56天的养殖实验,并分别设计了6组豆粕蛋白质梯度饲料（实测含量为20.95%、24.83%、27.68%、32.26%、35.98%和39.76%,命名为SM1、SM2、SM3、SM4、SM5和SM6）和6组黄粉虫蛋白质梯度饲料（实测含量为20.94%、24.97%、29.00%、33.03%、37.06%和41.09%,命名为MW1、MW2、MW3、MW4、MW5和MW6）。采用嗅觉电生理法检测了草鱼嗅觉系统对黄粉虫（MW3、MW6）和豆粕饲料（SM3、SM6）的反应程度。养殖实验结束后,结合生长性能、饲料利用率和嗅觉电生理结果综合分析了草鱼对豆粕和黄粉虫的蛋白质需求,以及黄粉虫饲料的利用潜力。随后,分析了草鱼生理生化指标、质地、肌肉发育基因和组织病理变化,并结合肌肉和脾脏转录组揭示了饲料蛋白质水平对草鱼品质和健康的潜在影响机制。1.豆粕和黄粉虫饲料对草鱼生长和摄食的影响在豆粕组,草鱼的终末体重、特定生长率、摄食率、干物质表观消化率和蛋白质表观消化率均在SM5组达到最高（P＜0.05）,并且基于特定生长率的双折线模型得出草鱼对豆粕蛋白质需求量为38.63%;在黄粉虫组,终末体重、特定生长率和蛋白质效率比在MW6组显著最高（P＜0.05）,而摄食率无差异性（P＞0.05）。此外,饲料蛋白源种类及蛋白质水平对草鱼的嗅觉电信号响应幅度和部分摄食相关基因（agrp和pomc）表达量影响显著（P＜0.05）,且因子间的交互作用显著（P＜0.05）。其中,豆粕饲料对部分摄食基因和嗅觉电信号幅度影响均显著（P＜0.05）,而在黄粉虫饲料组之间无差异性（P＞0.05）。综合生长和摄食结果,黄粉虫不适合单独作为草鱼饲料蛋白源,且饲料蛋白水平和蛋白源可影响嗅觉系统和脑组织中食欲相关基因的表达从而控制草鱼的摄食行为。2.饲料蛋白质水平对草鱼质地、肌球蛋白重链基因和肌肉转录组的影响适当的饲料蛋白（豆粕）水平提高了鱼肉硬度和p H值,同时降低了粗脂肪含量和烹饪损失,并改变了抗氧化能力和代谢酶活性。基于硬度值,草鱼对饲料蛋白的最佳需求量为31.66%。此外,适当的饲料蛋白质促进了myhc-1、myhc-4、myf5、myod、myog和fgf6a的表达,而抑制了myhc-7、myhc-2、mrf4和mstn的表达。肌肉的转录水平分析认为肉质特异性差异与紧密连接和肌肉内脂肪堆积有关。GSEA结果显示,与SM1相比,SM5组肌肉的脂肪酸代谢和氧化磷酸化显著下调（P＜0.05）。总之,适当的蛋白质水平通过调节肌肉抗氧化能力、myhcs基因表达和脂肪代谢相关通路来改善生长和肉质。3.饲料蛋白水平对草鱼健康和脾脏转录组的影响适当的饲料蛋白（豆粕）水平提高了血清溶菌酶活性、抗氧化能力,并改善了部分血清生化指标。在肝脏中,肝脏指数和肝脏脂肪含量随着日粮蛋白质水平的增加呈线性下降趋势,而谷草转氨酶和谷丙转氨酶的活性均呈线性增加。低蛋白饲料（SM1、SM2和SM3组）导致了草鱼肝脏出现了不同程度水肿,以及肝细胞质的空泡化和细胞核的异常,但随着饲料蛋白水平增加而明显改善。在肠道中,肠系膜脂肪指数、粘膜皱襞长度、肌层厚度、固有层宽度和杯状细胞数量受到蛋白水平的影响。此外,合理的蛋白质摄入也改善了脾脏指数（P＜0.05）,并且脾脏的KEGG分析显示,吞噬体途径、造血细胞谱系通路和蛋白质消化与吸收在缓解低蛋白饮食带来的健康负面影响上尤为重要。这些结果表明饲料蛋白质水平影响了草鱼的肝脏和肠道的健康,以及脾脏的免疫功能。本研究为豆粕在草鱼饲料中的使用提供了精确的使用量参考数据,并认为黄粉虫不宜作为草鱼的单一蛋白源。同时,适宜的蛋白水平有助于提高草鱼肌肉品质和健康水平。