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胚状体再生体系是探究植物整个分化机理及大规模生产优质植物的理想系统,胚性愈伤组织可作为遗传转化研究的靶向组织。本试验以黑比诺（Vitis vinefera L.cv.Pinot Noir）、贝达（V.riparia×V.labrusca Beta）葡萄试管苗的茎尖为材料,开展了三方面基础性研究工作:探讨了葡萄茎尖培养与胚状体诱导过程中外源激素配比、基因型、蔗糖浓度、有机物、培养基类型及培养方式等因素的影响;葡萄愈伤组织经继代培养,获得生长旺盛,松散易碎的胚性愈伤组织,并以此建立了胚性细胞悬浮系;以葡萄试管苗叶片、愈伤组织及悬浮细胞为材料探究了葡萄原生质体的分离条件,以期能获得大批高质量的原始材料,为葡萄品种改良和细胞工程奠定良好的理论和实践基础。主要结果如下:1.本试验在体细胞胚途径再生体系研究中采用黑比诺与贝达两个品种,以茎尖为外植体诱导愈伤组织,经初代培养,结果表明贝达葡萄的愈伤组织诱导率、增殖量及生长状态均高于黑比诺葡萄。2.黑比诺、贝达葡萄试管苗的茎尖愈伤组织诱导,适宜培养基为N6+6-BA 1.02.0mg·L-1+2,4-D 1.0 mg·L-1;胚性愈伤组织诱导分为3个阶段,首先在培养基X6+6-BA 0.5mg·L-1+NOA 0.5 mg·L-1中诱导30天,然后转接到培养基X6+6-BA 1.0 mg·L-1+NOA 1.0mg·L-1中培养30天,最后转接到培养基X6+6-BA 1.0 mg·L-1+NOA 0.5 mg·L-1+2,4-D 0.5mg·L-1上诱导培养。3.胚状体诱导阶段,在N6+6-BA 3.0 mg·L-1+2,4-D 0.5 mg·L-1+KT 0.1 mg·L-1上诱导率达70%。胚状体萌发以不含植物生长调节剂的MS培养基为宜;胚性愈伤组织的适宜继代培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+2,4-D 0.5 mg·L-1+KT 0.1 mg·L-1,在黑暗条件下保存效果较好。4.初步建立了黑比诺、贝达葡萄胚性细胞悬浮系。为保持悬浮系的良好状态,应挑选生长旺盛的愈伤组织以4 g/20 m L接种量在培养基B5+NAA 0.2 mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1中培养,适宜继代周期为710天。5.以悬浮细胞、愈伤组织及试管苗叶片为材料,分别对不同基因型、细胞状态、酶液组合及酶解时间进行了比较。结果表明,不同材料酶解原生质体能力大小为悬浮细胞>愈伤组织>叶片;在酶液组合纤维素酶12%+果胶酶0.25%+离析酶1%中酶解时间12 h分离效果较好。