储存蛋白是由幼虫脂肪体细胞合成并分泌释放到血淋巴内,在变态发育时再被脂肪体细胞以受体介导的方式吸收,用于重新构建蛹的组织与结构。蜜蜂是全变态昆虫,其个体发育历经卵、幼虫、蛹和成虫四个阶段。其中幼虫到蛹的变态发育阶段需要降解幼虫组织,重新构建蛹的组织与结构,这一过程涉及储存蛋白的作用。昆虫储存蛋白的核心功能是为昆虫从幼虫到蛹的变态发育提供物质基础和保障。此外,储存蛋白在不同的昆虫体内有不同的表达调控机制,担负着从变态、级型、性别决定、产卵、寿命到免疫等多样的生物学功能。为系统的探究储存蛋白在蜜蜂体内的表达模式及其可能的生物学功能,本试验利用SDS-PAGE电泳技术在蛋白水平上对处于变态期前后的蜜蜂三型蜂的储存蛋白进行检测和分析,评价hexamerin在三型蜂变态发育中的作用。结果表明幼虫期血淋巴内蛋白含量较少,可检测到的蛋白种类也较少。而到了预蛹期,血淋巴内的蛋白含量迅速增高,蛋白的种类也迅速增加。且最为明显的一个变化是该时期血淋巴新出现了4种含量极高的蛋白,经蛋白测序分析它们为蜜蜂hexamerin储存蛋白,它们合计占据血淋巴总蛋白的80%以上,随着变态发育过程的进行,这四种蛋白的含量也逐渐减少,至羽化时血淋巴内基本检测不到了。四种hexamerin蛋白在血淋巴的含量虽然在三型蜂发育期整体趋势大体一致,但是在相同的发育时期,同一种hexamerin在工蜂、蜂王、雄蜂血淋巴内的含量也有差别,在蜂王和雄蜂血淋巴内含量比工蜂血淋巴内含量要高,在三型蜂体内表现出不完全一致表达的特性。RNAi普遍应用于各种基因生物功能的研究中。大量合成纯净的dsRNA是RNAi相关试验和实践应用的前提。本试验采用试剂盒体外转录和用大肠杆菌诱导两种方法合成hex110 dsRNA和hex70b dsRNA,均成功的获得目标的dsRNA。尤其是大肠杆菌诱导合成dsRNA的技术体系的建立,为后续功能研究及其他蜜蜂相关基因的应用打下了基础。在此基础上。我们将合成的dsRNA分别对蜜蜂工蜂,雄蜂和蜂王进行饲喂和显微注射两种方法的干扰试验,实验结果表明,dsRNA并没有使hex110和hex70b基因沉默,hex110和hex70b仍有表达。干涉研究其功能的工作还需进一步的探究。本试验利用SDS-PAGE电泳技术通过对处于变态期前后的蜜蜂三型蜂在蛋白水平上储存蛋白进行检测和分析,从蛋白层面评价hexamerin在三型蜂变态发育中的作用。进而利用试剂盒体外转录和大肠杆菌诱导两种方法合成的hex110 dsRNA和hex70bdsRNA,成功的建立了利用大肠杆菌诱导合成的大量的应用级别的dsRNA技术和方法,这为类似的研究和应用打下了基础,同时还利用合成的dsRNA对蜜蜂工蜂、雄蜂和蜂王进行干涉试验探索。