发酵银杏茶脱毒效应的研究

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银杏茶是用银杏叶精制的保健茶,其成分银杏黄酮和内酯在预防和治疗心脑血管疾病有显著功效,但是,银杏茶也含有毒成分银杏酸(GinkgolicAcids,Gas)。目前,在银杏茶加工过程中如何脱除GAs的研究较少。本文采用超声波辅助法提取GAs,并采用正交设计法对提取工艺进行优化,用高效液相色谱法对GAs进行检测分析;对石油醚纯化银杏黄酮的工艺采用正交设计进行优化,纯化后采用超声波辅助法提取银杏黄酮,用硝酸铝比色法对银杏黄酮进行检测;对人工接种发酵制作银杏散茶和紧压银杏茶的工艺的研究,并采用正交设计进行优化,并对理化性质及感官指标进行检测评定。试验主要研究结果如下:(1)优化超声波法辅助提取银杏酸,其最佳提取条件:正己烷为提取剂,液料比为40:1(mL/g)、提取时间为40min、超声功率为240W、提取温度50℃,此时银杏茶银杏酸的得率为1.09%。HPLC色谱条件为:色谱柱:DiamonsilC18(2)(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-3%冰醋酸溶液(90:10,v/v),流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长310nm,进样量20μL。出峰的银杏酸单体分别为C13:0、C15:1、C17:2、C15:0、C17:1,且百分比例分别为11.94%、27.25%、3.25%、2.05%、55.51%。薄层纯化和硅胶柱层析均能对银杏酸正己烷粗提取液纯化,但薄层纯化方便、快捷、操作简单,薄层板制备选择硅胶G:0.4%CMC(1:2.5-3g/mL)铺板;展开剂石油醚:乙醚:冰醋酸(70:30:1,v/v/v)、石油醚:乙酸乙酯:冰醋酸(90:5:5,v/v/v)、石油醚:丙酮:甲酸(95:5:1,v/v/v)时,均可对银杏酸进行纯化,但当石油醚:丙酮:甲酸=95:5:1(v/v/v)时蓝色光带最窄,分离效果最佳,分离能力最强,故选择石油醚:丙酮:甲酸=95:5:1(v/v/v)。(2)优化石油醚纯化银杏黄酮工艺,其最佳纯化条件:液料比为50:1(mL/g)、提取时间为40min、超声功率为210W、提取温度40℃。纯化后,离心得到茶粉,以提取剂80%乙醇、液料比32:1(mL/g)、超声频率45KHz、超声功率240W、超声时间29min进行提取,采用硝酸铝比色法检测,测得银杏黄酮平均得率为1.56%。(3)优化银杏散茶的发花工艺,其最佳优化条件:汽蒸10min、接种量1mL、含水量40%、渥堆温度50℃、渥堆时间4h、发酵天数为9d,此时金花茂盛,颗粒饱满,汤色黄亮,滋味醇和,孢子数为13.8×106/干茶g,银杏酸含量从银杏叶的1.42%降低到银杏散茶的0.63%,脱除率达55.63%,银杏总黄酮含量从1.49%增加到1.85%,增加了24.46%;随着发酵时间的延长,银杏酸含量降低,与冠突散囊菌的数量呈负相关;随着发酵时间的延长,银杏黄酮含量先缓慢降低,然后升高。(4)优化紧压银杏茶的发花工艺,其最佳优化条件:兑配比例为7:3、含水量为35%、渥堆温度为50℃、渥堆时间为8h,此时,银杏酸含量为0.41%,与原料相比,降低了58.8%,银杏黄酮的含量为1.89%,且金花茂盛,颗粒饱满,汤色橙黄明亮,滋味醇和,有浓郁的香气。
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