【摘 要】
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目的:本研究意在探究Delta阿片受体（DOR）是否为miR-874的靶基因,且miR-874是否通过靶向调控DOR进而对肝癌生物学行为产生影响。方法:1.q RT-PCR检测120对肝癌及配对的癌旁组织,检测成熟的miR-874在肝癌组织中的表达情况。2.免疫组织化学检测120对肝癌及配对的癌旁组织中DOR的相对表达量。3.分析miR-874表达量与120例HCC患者临床病理参数之间的关系。4.
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目的:本研究意在探究Delta阿片受体（DOR）是否为miR-874的靶基因,且miR-874是否通过靶向调控DOR进而对肝癌生物学行为产生影响。方法:1.q RT-PCR检测120对肝癌及配对的癌旁组织,检测成熟的miR-874在肝癌组织中的表达情况。2.免疫组织化学检测120对肝癌及配对的癌旁组织中DOR的相对表达量。3.分析miR-874表达量与120例HCC患者临床病理参数之间的关系。4.依据miR-874表达水平制作Kaplan-Meier生存分析。5.q RT-PCR检测miR-874和DOR在正常肝细胞及肝癌细胞系中的相对表达量,并根据侵袭实验结果筛选出肝癌细胞SK-Hep-1。6.斯皮尔曼相关系数分析miR-874和DOR在这6种细胞系中的相关性和侵袭能力。7.通过功能学实验检测miR-874对HCC细胞增殖、侵袭和迁移的影响。8.通过在线生物信息学软件预测miR-874的靶基因,进而探究miR-874如何调控靶基因并发挥作用。9.构建DOR质粒,并与miR-874共转染入SK-Hep-1细胞,检测修复DOR表达是否影响肝癌细胞的增殖、侵袭及迁移。10.裸鼠实验检测miR-874对肝脏肿瘤发生发展的作用。结果:1.q RT-PCR检测120对肝癌及配对的癌旁组织,发现成熟的miR-874在肝癌组织中呈低表达状态。2.免疫组织化学检测发现DOR在肝癌组织中呈高表达状态。3.通过肝癌组织中miR-874表达水平和临床病理特征的关系,我们发现miR-874的表达水平与肿瘤大小、肿瘤分化、TNM分期及血管侵袭呈负相关。4.Kaplan-Meier生存分析揭示了miR-874高表达组的5年总生存期及无复发生存期更长。5.q RT-PCR检测miR-874和DOR在正常肝细胞及肝癌细胞系中侵袭性的相对表达量,筛选出肝癌细胞SK-Hep-1。6.斯皮尔曼相关系数分析发现miR-874的表达水平与肝癌细胞系的侵袭能力呈负相关,而DOR则与之相反。7.功能学实验发现miR-874抑制HCC细胞增殖、侵袭和迁移。8.在线生物信息学软件预测DOR是miR-874的一个靶基因,且miR-874通过直接靶向调控DOR的3’UTR来抑制其表达。9.修复DOR表达促进肝癌细胞的增殖、侵袭及迁移。10.裸鼠实验发现miR-874抑制肝脏肿瘤的发生发展。结论:1.miR-874在肝癌组织和细胞中呈低表达状态。2.miR-874高表达组的HCC患者5年总生存期及无复发生存期更长。3.miR-874抑制肝癌细胞的增殖、侵袭及迁移,从而抑制肝脏肿瘤的发生发展。4.DOR是miR-874的一个靶基因,且miR-874通过靶向调控DOR的3’UTR来抑制其表达。
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