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[目的]在现代经络研究中,经脉与组织液、组织间隙和筋膜结缔组织相关是将经络与已知组织结构相联系的重要研究思路之一。本研究拟使用荧光照相的方法观察组织液通道的分布和形态,并观察阻断大鼠循经部位的组织液通道对大鼠相应生理功能的影响,探索阻断循经低流阻通道与“经脉不通”的相关性,为经络实质的研究提供新的方法和实验依据。[方法]1.实验一:使用荧光照相法对大鼠任脉低流阻通道的观察24只5～8周龄健康成年雄性SD大鼠,按随机数字表法分为任脉低电阻点组(LIP组)、任脉低流阻点组(LHRP组)、任脉旁开组(旁开组),每组8只。将大鼠麻醉后对其腹部进行脱毛处理,使用经络定位仪定位大鼠腹中线上的低电阻线,剥离腹部皮肤。LIP组在任脉低电阻线上注射荧光素钠,LHRP组使用流阻仪定位任脉低流阻点并注射荧光素钠,旁开组使用流阻仪在任脉低电阻线旁开处定位一高流阻点并注射荧光素钠。使用荧光照相法观察各组大鼠荧光素钠的迁移情况及分布规律。2.实验二:结扎对任脉低流阻通道荧光素钠迁移影响的观察21只5～8周龄健康成年雄性SD大鼠,其中清醒不结扎组和清醒结扎组各8只,麻醉不结扎组5只。清醒结扎组大鼠在实验前一周使用外科手术法结扎任脉低流阻通道。麻醉不结扎组大鼠使用戊巴比妥钠麻醉,清醒不结扎组与清醒结扎组大鼠使用混合氧将大鼠麻醉。使用经络定位仪测定大鼠腹部任脉低电阻线,使用流阻仪定位大鼠腹部任脉低流阻点,在任脉低流阻点注射荧光素钠。清醒不结扎组与清醒结扎组在注射荧光素钠后将大鼠放回饲养笼,待其活动15 min后重新麻醉,使用荧光照相法采集注射荧光素钠20min后的荧光迁移图像,分析比较三组大鼠荧光素钠迁移轨迹的特征。3.实验三:结扎任脉低流阻通道对生殖系统影响的观察24只4周龄雌性SD大鼠随机分为任脉结扎组、非经结扎组和空白对照组,每组8只。将大鼠麻醉后对其腹部脱毛处理,测定大鼠任脉低电阻线,任脉结扎组(任脉组)和非经结扎组(非经组)分别在任脉低流阻通道上和任脉旁开处进行结扎。每周观察大鼠体重变化,在造模后第5周测定血清激素水平,解剖分离脏器,计算脏器系数。[结果]1.实验一:(1)荧光素钠轨迹特征:LIP组和LHRP组可观察到以注射点为中心向周围扩散及沿任脉循行方向的线状迁移轨迹,旁开组仅出现以注射点为中心向四周的扩散,没有线状迁移轨迹。(2)荧光素钠沿任脉方向迁移长度:LIP组平均长度1.88±0.31 cm,LHRP组平均长度1.73 ± 0.26 cm,极显著长于旁开组平均长度1.19±0.18 cm(P<0.01);LHRP组的长度略小于LIP组,但差异无统计学意义(P>0.05)。(3)荧光素钠轨迹宽度:LIP组平均宽度0.71±0.15 cm,LHRP组平均宽度0.63±0.19 cm,极显著小于旁开组平均宽度1.21±0.28 cm(P<0.01);LHRP组的宽度略小于LIP组,但差异无统计学意义(P>0.05)。(4)荧光素钠轨迹长宽比:LIP组平均长宽比2.67 ±0.26,LHRP组平均长宽比2.99±0.93,均极显著大于旁开组平均长宽比1.02±0.17(P<0.01),LHRP组的长宽比略大于LIP组,但差异无统计学意义(P>0.05)。(5)荧光素钠迁移速度:LIP组平均迁移速度0.166±0.059 cm/min,LHRP组平均迁移速度0.135 ± 0.048 cm/min,均极显著快于旁开组平均速度 0.040±0.037 cm/min(P<0.01);LHRP组的速度略大于LIP组,但无统计学差异(P>0.05)。2.实验二:(1)荧光素钠沿任脉方向的迁移长度:清醒不结扎组平均长度4.81±0.45 cm,极显著长于麻醉不结扎组平均长度2.58±0.36 cm和清醒结扎组平均长度2.12±0.22 cm(P<0.01)。(2)荧光素钠轨迹宽度:清醒不结扎组和清醒结扎组的荧光素钠轨迹宽度略小于麻醉不结扎组,但无统计学差异(P>0.05)。(3)荧光素钠轨迹长宽比:清醒不结扎组长宽比为2.64±0.28,极显著大于麻醉不结扎组1.10±0.10和清醒结扎组 1.15±0.10(P<0.01)。3.实验三:(1)体重:任脉结扎组大鼠体重在造模后第一周、第三周均极显著低于同时期空白对照组(P<0.01);在造模后第三周极显著低于同时期非经结扎组(P<0.01)。(2)血清E2、FSH、LH:与空白对照组相比,任脉结扎组大鼠血清E2、FSH、LH显著降低(P<0.05或P<0.01),非经结扎组大鼠FSH极显著降低(P<0.01);与非经结扎组相比,任脉结扎组大鼠血清E2、FSH、LH显著降低(P<0.05或P<0.01)。(3)脏器重量系数:与空白对照组相比,任脉结扎组的卵巢和肾脏重量系数显著降低(P<0.05),脾脏重量系数显著升高(P<0.05),非经结扎组脾脏重量系数显著升高(P<0.05);与非经结扎组相比,任脉结扎组卵巢和肾脏重量系数显著降低(P<0.05)。[结论]1.建立了基于荧光照相法的循经低流阻通道可视化观察方法,为经络的可视化研究提供了安全便捷的新方法。2.使用可视化的方法直观地观察到了大鼠任脉低流阻通道的存在,证明了组织液在任脉循行部位存在循经脉方向的流动而不是向四周均匀扩散,并验证了结扎对任脉低流阻通道的阻断作用。3.结扎任脉低流阻通道可使大鼠血清E2、LH、FSH水平降低。说明阻断大鼠任脉低流阻通道可对大鼠生殖功能造成影响,证明任脉低流阻通道可能与任脉有一定相关性,为经脉的低流阻通道假说提供了实验依据。