实验性大鼠左侧精索静脉曲张对睾丸Leydig细胞的影响

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目的 建立精索静脉曲张(Varicocele,VC)大鼠模型,研究VC对血清睾酮和睾丸内睾酮的影响;研究VC对睾丸Leydig细胞凋亡的影响,以探讨VC是否引起Leydig细胞总量的变化;研究Leydig细胞内StAR mRNA表达的变化,以探讨单个Leydig细胞合成睾酮能力是否降低。以确定VC是否对睾丸Leydig细胞形态、功能产生影响。 方法 1.购买青春期SD大鼠,分为4周对照组、4周实验组;8周对照组、8周实验组,每组各10只。通过部分结扎左肾静脉造成左侧精索静脉曲张模型,曲张精索内静脉内径增粗约3倍者作为实验组。4周、8周时处死大鼠取出睾丸称重,4%多聚甲醛/0.1M固定液固定,做HE染色。Image-pro plus 4.5彩色图像分析系统下测量曲细精管直径。 2.4、8周时处死大鼠,取静脉血用放免法测定血清睾酮浓度;取部分睾丸组织称重,按1/3(W/V)比例用甲醇匀浆;匀浆转入15ml离心管中,室温过夜;1800×g离心30分钟,提取上清液;烘干;以400ul二乙醚提纯二次,提纯液进行放免法测定。 3.部分睾丸经3%戊二醛预固定,1%四氧化锇再固定,丙酮逐级脱水,Epon812包埋,半薄切片光学定位,超薄切片,醋酸铀及枸橼酸铅双重染色,日立H-600IV型投射电镜观察。
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