肾脏纤维化是慢性肾脏病进展的主要病理生理因素，可缓慢、进行性发展至终末期肾脏病，给社会及家庭带来沉重的经济负担。黄芪甲苷(Astragaloside IV,AS-IV)是中药黄芪的主要有效成分之一，临床实践及现代药理提示黄芪对延缓慢性肾脏病进展具有显著作用[1]。目前黄芪甲苷对肾纤维化的作用尚不明确，本研究围绕黄芪甲苷对肾纤维化的作用机制进行探讨。目的：明确黄芪甲苷对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction, UUO)模型发生肾脏纤维化的干预作用，明确黄芪甲苷对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞损伤的作用，并初步探讨其作用机制。方法：雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组（Sham组）（n=8）、模型组（UUO组）（n=10）、黄芪甲苷干预组（AS-IV组）（n=10）。模型组和黄芪甲苷干预组均采用单侧输尿管结扎（UUO）建立肾纤维化模型，Sham组不做输尿管结扎余操作相同。黄芪甲苷干预组在术后当天及其后连续7天给予AS-IV20mg/(kg×d)灌胃，Sham组及UUO组小鼠同时给予等量溶剂灌胃。分别于术后第7、14天采集双侧肾组织标本，记录肾重及体重。肾组织切片行HE、MASSON染色，观察病理改变情况。采用TUNEL法检测肾组织的细胞凋亡情况。采用蛋白质免疫印迹（western blotting）及实时定量荧光PCR（real-time PCR）法，分别检测纤连蛋白(fibronectin)、collagen IV、α-SMA、TGF-β1表达，并western blotting观察p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK MAPK蛋白表达情况。体外培养人肾小管上皮细胞株（HK2），分为正常组（Ctl）、模型组（TGF-β1）、黄芪甲苷干预组（AS-IV）。模型组和干预组均采用TGF-β1（10ng/ml）刺激细胞，干预组同时加入不同浓度的AS-IV（50,100,200ug/ml），刺激后12,24,48h收集各组细胞。提取细胞蛋白样品，western blotting检测纤连蛋白、collagen IV、α-SMA表达情况。CCK8法检测细胞活性，TUNEL法检测细胞凋亡，并检测p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK MAPK信号蛋白表达水平。进一步研究提前30分钟给予SB203580(10μM)抑制p38磷酸化，探讨并对比其与AS-IV对肾小管上皮细胞的保护作用。结果：术后第14天UUO组小鼠梗阻侧的肾重/体重比值（KW/BW）较对侧显著下降（P<0.05），而AS-IV干预后可缓解KW/BW的缩小（P<0.05）。与Sham组相比，术后第14天梗阻侧肾脏的病理学表现出多处肾小管间质纤维化改变，同时检测发现，UUO组第14天梗阻肾组织纤连蛋白、collagen IV、α-SMA、TGF-β1蛋白及mRNA表达增多（均P<0.05），AS-IV组梗阻侧肾脏纤维化改变显著减轻（P<0.05），纤连蛋白、collagen IV、α-SMA、TGF-β1表达量较模型组减少（均P<0.05）。UUO组梗阻侧肾脏细胞凋亡较Sham组显著增加（P<0.05），术后14天AS-IV组的细胞凋亡程度较UUO组减轻（P<0.05）。UUO组p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK MAPK均表达增高（均P<0.05），而黄芪甲苷干预显著改善MAPK信号蛋白的激活（均P<0.05）。TGF-β1刺激后出现细胞活性下降（P<0.05），细胞凋亡增多（P<0.05），纤连蛋白、collagen IV、α-SMA表达水平增高（均P<0.05），p-p38/p38、p-JNK/JNK蛋白表达增多（均P<0.05），而p-ERK/ERK未见明显改变。而黄芪甲苷干预可显著改善细胞活性（P<0.05），减少细胞凋亡的发生（P<0.05），减少纤连蛋白、collagen IV、α-SMA蛋白表达（均P<0.05）。同时AS-IV干预降低p-p38/p38、p-JNK/JNK水平（均P<0.05）。提前给予SB03580抑制p38磷酸化，同样表现出collagen IV、α-SMA表达的减少（均P<0.05）。结论：AS-IV可改善UUO和TGF-β1诱导的肾小管间质纤维化进展和减少细胞凋亡。黄芪甲苷的抗纤维化作用，可能是通过抑制p38、JNK MAPK信号通路活化，减少肾小管上皮细胞的凋亡，进而发挥改善肾小管间质纤维化的作用。