近年来环境污染十分严重，尤其是能够以固态、液态和气态迁移的铅污染更是十分普遍，导致铅中毒事件时有发生，给人们的健康带来了较大危害。针对这一现状，我们实验室从2011年开始，分别采用生物学方法和化学方法开展了排铅技术研究，取得了较为理想的效果。本研究采用双向电泳技术，对试验组JT1菌株和对照组M菌株进行了蛋白组学分析，以期获得二者耐铅功能差异蛋白，揭示其铅吸附机制。　　本研究主要内容包括：⑴从“妈咪爱”活菌冻干粉中分离鉴定菌株M为屎肠球菌；经过菌株Pb2+吸附试验，得到菌株JT1和M对Pb2+的吸附率分别是55.83%及11.87%，差异显著，具备蛋白组学试验基础；菌株体外铅吸附的影响因素试验表明，在100mg/L的Pb2+浓度中，屎肠球菌JT1和菌株M在pH值6.5～7.5范围内吸附性良好；菌株对铅的吸附是一个快速反应过程，在45min内吸附率基本不变；在25～40℃的温度范围内，菌株对Pb2+的吸附率较为稳定；JT1和M菌株的生长特性试验表明，37℃下培养18h，两种菌株同时达到对数生长末期，且JT1和M菌株生长的最适pH值分别是6.5及7.5。⑵根据等电点、相对分子质量差异分离细胞全蛋白，进行二维电泳，建立JT1和M菌株双向电泳图谱；经扫描仪扫描及PDquest8.0软件分析，依据JT1和M菌株灰度值之比，筛选得到差异蛋白总数为92个，其中有33个在JT1菌株的表达量相对于M全部显示上调,有59个在M菌株的表达量相对于JT1全部显示上调；从上述33个蛋白点筛选11个M/JT1值小于0.5（倍数标准Fold change=2）、59个蛋白点筛选10个M/JT1大于2（倍数标准Fold change=2），且P值均小于0.05的共计21个差异显著点进行蛋白质质谱鉴定，鉴定得到19种蛋白质及其分子量，等电点，覆盖率，匹配的肽段序列等蛋白基本信息。⑶通过Mascot质谱检索软件，应用NCBI BLAST对19种差异蛋白进行蛋白质的生物信息学分析。结果表明，21个差异点对应的19种差异蛋白主要分为六种功能蛋白，分别是细胞胁迫响应、糖类代谢、小分子代谢、核酸代谢、细胞增殖、蛋白质代谢蛋白；多种蛋白协同表达共同抵抗pb2+氧化胁迫，其中，半胱氨酸合酶A是与小分子代谢相关的蛋白，在有氧生长中能增加半胱氨酸以及谷胱甘肽的合成，半胱氨酸与Pb2+可形成不溶性的硫醇盐进而使菌体能够抵抗氧化胁迫，对Pb2+造成的活性氧增加引起的细胞结构损伤有着良好的缓解作用，从而提高菌株耐铅性；半胱氨酸合酶A还与谷胱甘肽的合成相关，谷胱甘肽可以提升菌体抗酸胁迫和抗毒胁迫的能力，增加JT1菌株对Pb2+的抗渗透力以及作为直接作用细胞内金属离子的螯合剂；半胱氨酸合酶A为JT1菌株耐铅性的关键蛋白，同时作为JT1对菌株M的上调蛋白，灰度值之比达到了0.000386，P值为0.01，是所有差异显著蛋白点中最为合理的蛋白点；此外，对耐铅屎肠球菌JT1半胱氨酸合酶A保守结构域 CBS_like进行了分析，确立了三维结构功能特异位点。