第一部分:不同浓度过氧化氢对A549细胞p-p38、MKP-1和HDAC-1、-2、-3的影响目的通过建立不同浓度过氧化氢（H₂O₂）干预的A549细胞模型,探讨不同浓度H₂O₂对A549细胞p-p38、MKP-1和HDAC-1、-2、-3蛋白表达的影响。方法不同浓度H₂O₂干预A549细胞12h,采用MTT、CCK8和LDH法检测A549细胞活力和受抑情况,Western blot法检测p-p38、MKP-1和HDAC-1、-2、-3蛋白表达。结果1.随着H₂O₂浓度提高和作用时间延长,A549细胞存活率呈浓度、时间依赖方式下降。结合CCK8、MTT和LDH结果,选择H₂O₂干预12h作为后续研究干预时间,这样既可对A549细胞产生较明显影响,同时又不会对细胞造成太大伤害影响后续实验结果。2.不同浓度H₂O₂干预A549细胞12h,与对照组（H₂O₂浓度为0umol/L）相比,随着H₂O₂浓度增加,p-p38、MKP-1蛋白表达水平呈逐渐升高趋势,当H₂O₂浓度增高至400umol/L时,p-p38、MKP-1蛋白表达量与对照组差异显著（p<0.01）;随着H₂O₂浓度的增加,HDAC-1、-2、-3蛋白表达水平呈逐渐降低趋势,HDAC-1、-2、-3对H₂O₂浓度敏感性不同,当H₂O₂浓度增加至100umol/L时,HDAC-1表达与对照组差异具有统计学意义（p<0.05）,增加至200umol/L时,HDAC-3表达与对照组差异具有统计学意义（p<0.05）,增加至400umol/L时,HDAC-2表达量与对照组差异具有统计学意义（p<0.05）。结论通过建立氧化应激性肺损伤A549细胞模型,初步证实p-p38、MKP-1和HDAC-1、-2、-3参与肺细胞氧化应激性损伤过程。第二部分:过氧化氢、维甲酸对A549细胞p-p38、MKP-1和HDAC-1、-2、-3表达的影响目的建立H₂O₂和维甲酸（RA）干预的A549细胞模型,探讨H₂O₂和RA对A549细胞p-p38、MKP-1和HDAC-1、-2、-3蛋白表达的影响。方法取对数生长期A549细胞随机分为4组（对照组、H₂O₂组、RA组、H₂O₂+RA组）干预8、12、24h,采用Western blot法检测p-p38、MKP-1和HDAC-1、-2、-3蛋白表达,流式细胞仪检测A549细胞早期凋亡、晚期凋亡和坏死情况。结果1.RA和H₂O₂干预A549细胞8、12、24h,干预时间为8h时,与对照组比较,H₂O₂组p-p38蛋白表达水平显著增高（p<0.05）,RA可使H₂O₂干预后的A549细胞p-p38蛋白表达部分降低,但与H₂O₂组相比差异不显著（p>0.05）;RA组和H₂O₂组MKP-1蛋白表达水平均显著升高（p<0.01）,两者同时使用时MKP-1表达进一步增高,与H₂O₂组相比差异具有统计学意义（p<0.01）;H₂O₂组HDAC-1、-2、-3表达水平不同程度降低（p<0.05）,RA可使H₂O₂干预后的A549细胞蛋白HDAC-1、-2表达增高,与H₂O₂组相比差异具有统计学意义（p<0.05）,但对HDAC-3蛋白促表达作用未见明显统计学差异（p>0.05）。干预时间为12、24h时,与对照组相比,H₂O₂组p-p38蛋白表达水平显著增高（p<0.01）,RA可使H₂O₂干预后的A549细胞p-p38蛋白表达显著降低（p<0.05）;MKP-1蛋白表达趋势基本与8h一致;H₂O₂组HDAC-1、-2、-3表达水平不同程度降低（p<0.01）,RA可使H₂O₂干预后的A549细胞蛋白HDAC-1、-2、-3表达部分增高,与H₂O₂组相比差异具有统计学意义（p<0.05）。2.RA和H₂O₂干预A549细胞8、12、24h,干预时间为8h时,与对照组比较,H₂O₂可使早期凋亡细胞明显增加（p<0.01）,晚期凋亡+死亡细胞增加不显著（p>0.05）,RA对H₂O₂诱导凋亡的细胞未见明显保护作用（p>0.05）;干预时间延长至12、24h时,H₂O₂使早期凋亡细胞和晚期凋亡+坏死细胞均明显增加（p<0.001）,RA可部分逆转H₂O₂干预所导致的细胞凋亡、坏死,与H₂O₂组相比差异具有统计学意义（p<0.001）。结论初步证实RA可通过调控HDACs和MKP-1表达,调节p38 MAPKs信号通路活性,在肺细胞氧化应激性损伤中发挥保护作用。