肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,是一种严重威胁人类健康的疾病。放射治疗是临床上常用的治疗手段,为了增加肿瘤细胞对放射线的敏感性,寻找最佳放射增敏剂是非常重要的工作。因此,本实验以A549细胞株为实验对象,研究了临床上常用的化疗药物卡铂对A549细胞的放射增敏作用。方法1细胞培养实验所用的细胞为A549细胞,所有实验都在条件为温度37±0.3℃、相对湿度≥95%、CO2浓度5±0.1%的细胞培养箱内培养。2实验方法应用MTT比色法、生长曲线法观察卡铂对A549细胞增殖能力的影响。用平板克隆培养法观察A549细胞在不同的实验分组的条件下的克隆增殖能了,并观察形态学差异。用流式细胞仪测定细胞周期、细胞凋亡。用Transwell侵袭小室观察了A549细胞在不同实验条件下的侵袭能力的变化。结果1卡铂对A549细胞的增殖能力的影响MTT比色法的实验结果显示,卡铂对A549细胞的IC50、IC20分别为13.22μg/ml、3.29μg/ml。然后分别取IC20附近的三个浓度1μg/ml、3μg/ml、5μg/ml作细胞的生长曲线,结果显示3μg/ml的浓度最接近IC20显示了它在3天时间内对细胞没有毒性,可以用这个浓度做放疗增敏实验。2卡铂对A549细胞的放射敏感性的影响2.1对克隆能力的影响从多靶单击模型参数分析,3μg/ml浓度的卡铂处理A549细胞后对放射线最敏感,D0=1.41;5μg/ml浓度的卡铂处理细胞,药物本身对细胞影响比较严重,因此增敏效果不好,D0=1.42;1μg/ml浓度的卡铂处理细胞,由于药物浓度太低,对放射增敏的效果不好,Do=1.70；对照组的Do=1.77。因此在接近IC20的浓度更能体现增敏剂的放射增敏作用。2.2对细胞周期的影响卡铂处理细胞后照射组,增加了S期细胞对射线的敏感性,与对照组相比S期降低48.03%,这预示着肿瘤细胞的增殖能力降低。2.3对细胞凋亡的影响对照组、照射组、给药组、给药照射组的凋亡率分别为14.51%、21.15%、19.02%、55.77%。卡铂处理细胞后照射组细胞的凋亡率是对照组的2.84倍。2.4对侵袭能力的影响对照组、照射组、给药组、给药照射组与对照组相比侵袭能力都有降低,且都有统计学差异。但是给药照射组细胞的侵袭能力比其它各组都低,与对照组相比侵袭能力降低51.97%。3细胞形态学的变化平板克隆形成实验中,观察到卡铂处理后放射组的细胞集落中有些细胞的胞浆中出现空泡,而对照组、单纯给药组、单纯放射组却观察不到这种现象。结论1.卡铂对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制在研究的浓度范围内呈浓度依赖性和时间依赖性,并有明显的量效关系。2.A549细胞的克隆形成率与放射剂量呈负相关,相同剂量下卡铂+照射组的克隆形成率低于单纯照射组。3.小剂量卡铂可提高人肺腺癌A549细胞的放射敏感性,其作用机制可能为诱导细胞的凋亡。4.小剂量卡铂对人肺腺癌A549细胞具有抑制侵袭的能力。5.卡铂有可能成为治疗A549细胞有效的放射增敏剂。