【摘 要】
：
泰乐菌素是弗氏链霉菌（Streptomyces fradiae）通过发酵获得的一种16元大环内酯类抗生素,被国内外广泛用作畜禽专用抗生素和饲料添加剂。其衍生物泰万菌素,可通过耐热链霉菌（Streptomyces thermotolerans）生物转化泰乐菌素获得,泰万菌素对支原体的抗菌活性是泰乐菌素的4倍,并且对多种抗生素耐药菌均具有抑制作用,也是国内外广泛使用的兽药。本研究拟通过丁烯酰辅酶A还原
论文部分内容阅读
泰乐菌素是弗氏链霉菌（Streptomyces fradiae）通过发酵获得的一种16元大环内酯类抗生素,被国内外广泛用作畜禽专用抗生素和饲料添加剂。其衍生物泰万菌素,可通过耐热链霉菌（Streptomyces thermotolerans）生物转化泰乐菌素获得,泰万菌素对支原体的抗菌活性是泰乐菌素的4倍,并且对多种抗生素耐药菌均具有抑制作用,也是国内外广泛使用的兽药。本研究拟通过丁烯酰辅酶A还原酶（CCR）和P450氧化酶在弗氏链霉菌QL100中的表达,来提高泰乐菌素的产量,结果发现,来源于泰乐菌素生产菌的CCR基因orf4*,ccr2,以及来源于米尔贝霉素生产菌的CCR基因SBI-01394和SBI-02836在弗氏链霉菌过表达后,可分别使泰乐菌素的产量提高22.48%,21.31%,26.08%和23.03%。同源的P450氧化酶基因tyl I的过表达可使产量提高11.37%,而外源的p450氧化酶基因ros C的过表达使产量降低了30%。实验通过多拷贝质粒p KC1140构建了乙酰化基因acy A,异戊酰化基因acy B1,正调控基因acy B2和acy B1B2重组质粒,来提高泰万菌素的产量,结果发现,四个基因分别使泰万菌素的产量提高了3.30%,4.27%,5.23%和14.69%。随后考察acy B1B2在不同的载体对泰万菌素产量的影响,构建了p SET153-acy B1B2重组质粒,结果表明,p SET153-acy B1B2使产量提高了12.38%,与p KC1140-acy B1B2相比差距较小,而p SET153载体的稳定性远高于p KC1140,两个表达菌株对泰乐菌素的耐受性为150μg/m L,均提高了50%。综上所述,选择p SET153质粒作为acy B1B2的表达载体,其表达菌株将被用于工业生产。为了进一步提高泰万菌素的产量,通过响应面法对泰万菌素工业转化菌的摇瓶发酵条件进行优化,获得最优发酵条件:初始p H为8.0,发酵转速为260r/min,发酵温度为30℃,发酵时间为96h,转种量为7%,装液量为60m L和种龄为48h,泰万菌素的产量为7700.61μg/m L,与预测值的误差为3.21%,较原始发酵条件下的产量提高了15.46%,结果表明,运用响应面实验优化泰万菌素转化发酵条件可有效提高其产量。
其他文献
潜油电泵是一种工作于数千米深井下的重要机械采油设备,其机组工况监测对于提高开采效率、预测设备故障等具有重要意义。本文以开发潜油电泵工况多参数监测系统为目标,从软硬件开发、系统集成、实验验证等方面开展研究工作,主要工作包括:（1）从潜油电泵的泵效分析入手,明确了潜油电泵工作状态的监测参数与技术指标要求,设计了潜油电泵运行工况监测系统,包括井下数据采集模块与地面人机交互模块。开发了适用于监测系统工程应
随着单盘业务量的增长,现网中部署的光网络传输设备的业务槽位已经不能满足信息传输业务的需求,于是基于OTN（光传送网,Optical Transport Network）技术和集群技术开发一款新型的光网络传输设备成为通信行业的共同目标。基于集群架构的OTN（Cluster Architecture of Optical Transport Network,COTN）设备的开发解决了传统OTN单盘业务
保证能源安全对国家发展具有重大意义,石油仍是当下最重要的能源,而海洋石油正成为石油供给上最主要的来源。立管及其连接的水上海洋平台和水下海底管道,共同组成了生产及输送海洋石油的一整套系统。在各种不同型式的立管中,钢悬链线立管（简称SCR）在多方面展现出独特优势,能够降低生产成本、适宜更大开采深度和顺应多荷载及多自由度运动的作用,因而受到人们的广泛关注。对SCR的研究是当今海洋工程和油气开发领域的热点
自改革开放以来,随着中国经济的快速发展,我国的人口结构呈现出低出生率、低死亡率和低增长率。近年来,随着劳动力人口数量开始减少,我国人口老龄化趋势愈发明显,严重影响了我国的经济发展状况。对影响人口出生率的因素研究,是一项人口学研究的核心问题之一。本文以国内2007-2017年的面板数据为基础,提出了改进的自适应Lasso算法并用该算法对影响人口出生率的变量进行了稀疏选择。首先,介绍了Lasso方法、
海上浮码头有广阔的使用空间,它既可以在近海布置,又可以在远海布置。海上浮码头上部结构形式多样,通过系泊系统锚碇于海底,系泊方式可分为单点系泊或多点系泊,可以适应复杂多变的海洋环境,与固定码头相比造价更低。海上浮码头结构整体主要受风、浪、流等环境载荷和船舶靠泊、装卸等工作载荷的作用,通过系泊系统稳定上部结构抵御风、浪、流等环境载荷,以满足船舶靠泊,物资运输等工作要求。环境载荷对浮码头的运动情况和系缆
水下滑翔机是一种以浮力驱动方式按“锯齿形”轨迹运动的水下自航行器,具有续航能力强和成本低等优点,在海洋观测领域得到了广泛的应用。随着海洋研究广度的不断扩大,海洋科学家对水下滑翔机的续航能力提出了更高的要求。本文以国家科技项目为依托,面向我国深远海域环境监测需求,设计了长航程水下滑翔机工程样机,Petrel-L。针对Petrel-L样机续航能力提升问题,本文建立了水下滑翔机航程模型,确定了影响航程的
锈蚀和疲劳裂纹作为大型钢结构建筑中重要损伤形式,对结构安全产生严重威胁,有必要对此进行长周期的结构健康监测以确保结构安全平稳运行。采用无人机自身灵活便捷的监测方式可及早发现结构中锈蚀和疲劳裂纹,规避结构面临的潜在安全事故风险。本文利用无人机图像实现对钢结构表面锈蚀和疲劳裂纹区域的识别和定位工作,主要内容如下:将无人机图像经SLIC超像素分割算法分割,采用提出的锈蚀分割比率指标及CNN模型识别结果对
双金属复合管具有抗腐蚀、经济性高的优点,是解决高腐蚀性原油开采问题的一个重要手段。机械复合型双金属复合管由外层碳钢管和内层不锈钢衬里管通过机械工艺紧密结合而成,其中由热液压成型工艺制成的机械复合型双金属管结合力更为稳定。由于内衬管和外管之间的残余接触应力是影响双金属复合管性能的一项重要指标,本文首先研究了热液压成型工艺中残余接触应力的控制。考虑材料的非线性和内外管之间的接触特性,建立有限元模型对双
随着沿海城市建设规模的日益扩大,对土地资源的需求越来越多。围海造陆成为了中国沿海城市开发土地资源的重要途径之一。截至2020年全国围海造陆面积已超1100平方公里,这些土地已经投入或即将投入使用。新近形成的吹填土地基没有应力历史或应力历史较短,其主固结过程中的蠕变不容忽视。现有粘土地基沉降计算方法未考虑主固结过程中的蠕变,这会导致计算结果偏小,容易引发工程事故,例如:吹填场区下陷、道路建筑物不均匀