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背景在全球范围内,肺癌的发病率和死亡率在恶性肿瘤中位居前列,严重威胁着人类的健康与发展。因缺乏典型的临床特征及有效的筛查手段,多数患者诊断时已为中晚期,从而错失最佳手术治疗时机,其总体5年生存率仅为15%,故早发现、早诊断、早治疗对肺癌患者的预后具有极其重要的意义。然而目前临床常用的检查方法,如痰检、肿瘤标志物、胸水沉渣包埋、X线片、高分辨CT(HRCT)以及低剂量CT(LDCT)等由于灵敏度及特异度较低而不能明确肺癌诊断,所以病理学检查仍为诊断肺癌的“金标准”。但是因其创伤大、花费高以致在肺癌较早期阶段难以在临床广泛开展。为此,寻求一种创伤小、样本易得、价格低廉且灵敏度及特异度较高的诊断方法对肺癌诊断及早期诊断尤为重要。肿瘤相关抗原自身抗体是机体对肿瘤抗原发生免疫反应而产生的特异性抗体,可早于影像学改变出现在患者血清中,且在抗原消失后仍可稳定存在较长时间,因此有望成为新的诊断肺癌的生物标志物。目的使用酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)方法测定肺癌患者以及正常人群血清中anti-CK5、anti-CK7、anti-Napsin A、anti-P63以及anti-TTF-1的表达,评估单一自身抗体对肺癌的诊断价值,比较多种标志物联合对肺癌的诊断价值,分析自身抗体与对应肿瘤相关蛋白表达的相关性。方法1.收集2016年10月至2017年2月在郑州大学第一附属医院初次诊断为肺癌的254位患者,以及2019年5月在郑州大学第一附属医院体检中心体检结果为正常的222位健康人分别组成肺癌组和正常对照组。2.选定肺癌患者组织病理检测中常用的5种非小细胞肺癌相关抗原(CK5、CK7、Napsin A、P63、TTF-1)作为目标抗原,使用ELISA方法分别检测肺癌组及健康对照组患者血清中这5种抗原相应自身抗体的表达水平。设定特异度≥90%且约登指数最大所对应的OD值作为该指标的截断值,高于此值为阳性,低于此值则为阴性。3.比较肺癌组与对照组5种自身抗体的表达水平及阳性率的差异,计算每个自身抗体诊断肺癌的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比、阴性似然比等统计学指标,并绘制受试者工作特征曲线(Receiver Operating Characteristic,ROC),以曲线下面积(area under curve,AUC)评估各指标对肺癌的诊断价值。4.探讨这5种自身抗体是否可用于区分肺癌相关病理亚型,比较其在非小细胞肺癌组与对照组患者血清中表达水平、阳性率的不同,并计算其AUC值。5.分析临床特征与自身抗体表达的相关性,比较不同性别、年龄、吸烟史、临床分期、病理类型、淋巴结转移、远处转移等患者血清中自身抗体的表达水平、阳性率的差异。6.将单一或多个自身抗体与肿瘤标志物CEA结合以讨论多种标志物联合对肺癌的诊断效能。7.比较肿瘤相关蛋白不同表达的患者血清中相应自身抗体的表达水平及阳性率以了解两者之间的相关性。结果1.通过ELISA检测,anti-CK5、anti-CK7、anti-Napsin A、anti-P63以及anti-TTF-1在肺癌组的表达水平及阳性率均高于对照组(P<0.05),灵敏度和准确度的范围分别为13.78%～29.13%、50.21%～57.56%。ROC曲线结果显示5种自身抗体对肺癌均有一定的诊断价值,其中anti-CK7的诊断价值最高,AUC值为0.707(95%CI:0.660-0.753)。2.肺癌患者血清中anti-CK7、anti-P63及anti-TTF-1的表达水平随临床分期的进展而升高(P<0.05),而这5种自身抗体的表达水平均与年龄、性别、吸烟史、COPD、淋巴结转移、远处转移等因素无关(P>0.05)。3.非小细胞肺癌组患者血清中anti-CK5、anti-CK7、anti-P63以及anti-TTF-1的表达水平及阳性率均明显高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。特异度达90%以上时,anti-CK7的灵敏度和准确度最大,分别为27.96%、59.82%。ROC结果显示5种自身抗体对非小细胞肺癌均具有一定的诊断价值,其中anti-CK7的诊断价值最高,AUC值为0.713(95%CI:0.665-0.760)。此外,5种自身抗体在腺癌、鳞癌患者的鉴别诊断中差异无统计学意义(P>0.05)。4.在五种蛋白组织表达阳性和阴性的患者中,其相应自身抗体的表达水平和阳性率的差异无统计学意义(P>0.05)。5.每种自身抗体与肿瘤标志物CEA联合对肺癌诊断均有一定的价值,其AUC值从0.705(anti-CK5、CEA)到0.770(anti-CK7、CEA)。五种自身抗体与CEA联合后对肺癌诊断的AUC可升高至0.784。利用Logistic回归建立诊断模型:anti-CK7、anti-TTF-1联合CEA,诊断肺癌的AUC值也高达0.785。结论1.血清中5种自身抗体对肺癌具有潜在的诊断价值,且可用于非小细胞肺癌患者的筛查。2.自身抗体与对应肿瘤相关蛋白的表达无明显的相关性。3.Anti-CK7、anti-TTF-1联合肿瘤标志物CEA可提高肺癌的诊断价值。