自上世纪80年代年以来,中国水产养殖产量已连续30年位居世界第一。其中海鲈（Lateolabrax maculatus）养殖占比较大,据《中国渔业统计年鉴2018》可知,我国海水鱼养殖产量为141.93万吨,其中海鲈产量为15.66万吨,位居海水鱼第二。而随着海鲈养殖规模的不断扩大,病毒性疾病严重制约着海鲈养殖业的发展,前期实验中我们分离到一株海鲈虹彩病毒（Lateolabrax maculatus iridovirus,LMIV）,命名为LMIV1706。该病毒具有较强的毒力,剖检发病海鲈可见其内脏器官脾脏、肾脏和肝脏等严重出血肿大。对海鲈虹彩病毒感染的病理组织学进行研究以及建立一种快速、灵敏、适合基层临床诊断的检测方法对该病毒的致病机制以及防控具有重要意义。本研究开展以下两部分工作:一、通过病理组织学研究分析虹彩病毒感染海鲈后的病理组织学特点,HE切片染色观察到发病海鲈的主要脏器特别是造血器官脾脏严重出血、炎性细胞浸润、坏死;肝脏肿胀出血,肝小叶界限不清晰,出现大量空泡变性,且都出现大量的嗜碱性的肿大细胞,上述研究为进一步解析海鲈虹彩病毒感染的组织、器官嗜性,阐明致病机制提供了基础。二、利用交叉引物恒温扩增技术,针对海鲈虹彩病毒高保守区ATPase基因设计CPA引物,结合一次性核酸检测试纸条,优化反应体系和反应条件,建立可视化检测LMIV的交叉引物恒温扩增检测方法（Cross priming amplification,CPA）。结果表明,本研究建立的LMIV-CPA方法的最佳反应温度为62℃,最佳反应时间45 min,扩增产物配合一次性核酸试纸条检测装置进行检测,在3～5 min内即可肉眼判读结果。本研究用建立的LMIV-CPA方法特异性良好,不与其他水生常见病毒锦鲤疱疹病毒（Koi herpesvirus,KHV）、鲤浮肿病毒（Cyprinus edema virus,CEV）、中华鳖虹彩病毒（Soft-shelled turtle iridovirus,STIV）、斑点叉尾鮰疱疹病毒（Channel catfish virus,CCV）、流行性造血器官坏死病毒（Epizootic haematopietic necrosis virus,EHNV）和致病菌大肠杆菌（Escherichia coli）、无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）、肺炎克雷伯菌（Klebsiella Pneumoniae）、嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）发生交叉反应;LMIV-CPA方法和常规PCR方法共同检测79份临床样品（59份阳性,20份阴性）,LMIV-CPA的检出率和符合率84.7%和84.8%,常规PCR方法的检出率和符合率72.9%和78.5%。综合结果显示LMIV-CPA优于PCR,在比较二者的灵敏度差异时,LMIV-CPA的检测限制为102copies/μL,灵敏度是常规PCR的10倍。基于ATPase基因的虹彩病毒进化分析显示,LMIV1706与得到测序结果经NCBI blast比对,所测基因序列与笋壳鱼虹彩病毒Marble goby iridovirus（JF264208.1MGIV）的ATPase基因相似程度最高,为99.72%,仅有两个碱基的差别,与真鲷虹彩病毒Red sea bream iridovirus（AB666350.RSIV-2HSB）、海鲈虹彩病毒Sea bass iridovirus（AB043977.SBIV）、石斑鱼虹彩病毒Grouper iridovirus（AB043978.GIV）的相似率分别为99.58%、99.58%和98.61%,本研究根据虹彩病毒的保守基因ATPase,选取50株具有代表性的虹彩病毒构建系统发育树（见图20）。本试验一共设计了5条引物,5条引物都能结合的有大黄鱼虹彩病毒（AY779031.LYCIV）、真鲷虹彩病毒（AB666351.RSIV-TGA12）和真鲷虹彩病毒RSIV-2HSB（AB666350）,完全不能识别的有大菱鲆红体病虹彩病毒（AY608684.TRBIV）和天竺鲷虹彩病毒（AY521625.SGIV）。在比对B1引物的时候,第468位上有一个突变位点,是否能扩增出来还有待研究。但是,从理论上讲,这些与LMIV1706毒株ATPase基因同源性较高的大黄鱼虹彩病毒和真鲷虹彩病毒,也应当能被基于海鲈虹彩病毒而设计的LMIV-CPA方法所检出。LMIV-CPA检测方法不依赖昂贵的仪器设备,只需要简单的恒温系统如水浴锅,操作简单,可应用于海鲈虹彩病毒的现场快速检测,为LMIV的快速检测提供了有效技术支撑。