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研究背景:乳腺癌发源于乳房腺上皮组织,是女性肿瘤中发病首位的癌症,在女性肿瘤死亡人数占比中达到15%,发病率逐年上升,是对女性生命威胁最大的癌症。乳腺癌对女性最大的威胁不在于乳腺癌本身而在于乳腺癌的转移。进一步探究乳腺癌发生发展机制,开发新的乳腺癌诊断治疗方法,寻找新的诊断或治疗靶点仍然十分必要。目的:探讨乳腺癌中AKR1B10的表达与乳腺癌患者预后的关系并探究AKR1B10对乳腺癌细胞增殖迁移的影响,进一步探讨其机制,为进一步寻找乳腺癌的诊断或治疗标志物提供理论基础。方法:通过Kaplan-Meier Plotter数据库分析AKR1B10高表达与乳腺癌患者预后总生存期、无病生存期的关系。分别构建稳定过表达AKRIB10的乳腺癌细胞株MCF-7/AKR1B10以及敲降AKR1B10的乳腺癌细胞株BT-20/shAKR1B10。RT-qPCR、Western blot以及免疫组化检测乳腺癌及其配对正常组织中AKR1B10的表达情况。CCK8细胞增殖实验与细胞划痕实验检测过表达及敲降AKR1B10的乳腺癌细胞增殖与迁移情况。Western blot检测过表达与敲降AKR1B10的乳腺癌细胞中增殖相关蛋白cyclinD1、c-myc、survivin以及EMT相关蛋白twist、Snail、Slug、ZEB1、E-cadherin的表达情况。PIP3 ELISA试剂盒检测过表达及敲降AKR1B10的乳腺癌细胞中PIP3的表达情况。Western blot检测过表达与敲降AKR1B10 的乳腺癌细胞 PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、IKBα、p-IKBα、NF-κB p65、p-NF-κBp65蛋白的表达情况;分别提取细胞核蛋白与浆蛋白后检测BT-20对照及敲降AKR1B10的细胞核内NF-κB p65表达情况;应用PI3K抑制剂LY94002处理MCF-7细胞后检测细胞PI3K/AKT/NF-κB信号级联蛋白达情况,以及核蛋白与浆蛋白中NF-κB p65的表达情况。结果:生信分析结果显示高表达AKR1B10的乳腺癌患者预后较差。过表达AKR1B10后,MCF-7细胞增殖与迁移能力增加,cyclin D1,c-myc,survivin蛋白表达增加,EMT调控相关蛋白表达增加,E-cadherin蛋白表达下降;而敲降AKR1B10表达后,BT-20细胞增殖与迁移能力减弱,cyclin D1、c-myc、survivin蛋白表达下降,EMT调控相关蛋白表达下降。PIP3 ELISA检测显示过表达AKR1B10后MCF-7细胞PIP3表达增加,敲降AKR1B10后BT-20细胞PIP3表达降低。进一步实验发现,过表达AKR1B10后PI3K/AKT/NF-κB信号通路的级联相关蛋白表达增加;敲降AKR1B10后PI3K/AKT/NF-κB信号通路的级联相关蛋白表达下降;细胞核蛋白检测显示敲降AKR1B10后BT-20细胞核内NF-κB p65表达降低。应用PI3K抑制剂后MCF-7细胞PI3K/AKT/NF-κB信号级联相关蛋白表达降低,细胞核蛋白检测显示核内NF-κB p65表达降低。结论:1.AKR1B10在乳腺癌中高表达并与患者预后负相关,高表达AKR1B10的患者预后较差;2.AKR1B10促进乳腺癌细胞增殖和迁移;3.AKR1B10通过激活PI3K/AKT/NF-κB信号级联,调控增殖相关蛋白以及EMT相关蛋白的表达促进乳腺癌细胞增殖和迁移。