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神经介素S(Neuromedin S, NMS),是日本学者Mori等人于2005年发现的一种神经肽,主要分布于中枢神经系统、脾脏和睾丸组织。与神经介素U(NeuromedinU,NMU)享有相同的两个受体,分别是NMUR1和NMUR2。主要参与昼夜节律、摄食、生殖、神经内分泌等的调节。对NMS及其受体的研究主要集中在人、大鼠和小鼠等动物上,文献中暂无对兔NMS及其受体的研究。本研究参照GenBank中已发表的哺乳动物(猪、牛、人、大鼠、小鼠等)的基因保守区设计引物,利用RT-PCR技术克隆了兔NMS、NMUR2基因部分序列,应用生物信息学技术对其基因进行了序列分析和蛋白质结构与功能预测；其次,根据克隆出的已知兔NMS、NMUR2序列,利用Primer5.0软件重新设计PCR引物,对IMS、NMUR2mRNA在兔体内各个组织的分布进行了研究。并探讨了热应激时下丘脑-垂体-肾上腺轴NMS表达的变化。结果如下：(1)用RT-PCR技术首次成功地克隆了兔NMS和NMUR2基因部分序列,NMS基因片段长370bp,NMUR2长493bp,已经提交到GenBank(登录号：GQ167047、GQ167048)。(2)经DNASTAR软件分析兔NMS含有123个氨基酸,NMUR2含有164个氨基酸。氨基酸比对发现,兔NMS前体与羊、猪和牛同源性分别为97.6%、99.0%和95.1%；与人、黑猩猩、小鼠和大鼠同源性分别为79.7%、79.7%、70.7%和61.8%。兔NMUR2氨基酸与羊、猪和牛同源性分别为92.7%、87.5%和89.6%；与人、小鼠和大鼠的同源性分别为80.5%、76.2%和76.2%。(3)运用生物信息学技术预测,兔NMS基因等电点(pI)为10.57,其二级结构以α螺旋和无规卷曲为主；兔NMUR2基因等电点(pI)为9.91,其二级结构以α螺旋和折叠为主。(4)兔NMS和(?)MUR2mRNA在体内分布较广泛,NMS mRNA在下丘脑、中脑、延髓、气管、脾等组织表达；NMUR2mRNA在下丘脑、中脑、延髓、海马、大脑皮质、垂体、心、脾、子宫、卵巢等组织表达。(5)采用隔水式电热恒温培养箱建立42℃热应激兔的模型；使用半定量RT-PCR方法观测热应激0.5h、1h和2h后兔下丘脑、垂体、肾上腺轴中NMS mRNA的表达情况。在下丘脑NMS mRNA表达随着热应激时间的增加而增加,在1h表达丰度开始升高(P<0.05),2h表达丰度最高(P<0.05)；在垂体NMS mRNA表达随着热应激时间的增加而降低,在1h表达丰度开始下降(P<0.05),2h降至最低(P<0.05)；NMSmRNA在肾上腺表达随着热应激时间而变化,在1h表达丰度最高(P<0.01),2h开始下降(P<0.05)。以上情况表明,兔NMS及其受体基因在进化上是保守的；热应激时NMS基因在HPA轴的表达发生变化,提示它可能在热应激中发挥一定作用。其实验结果为研究兔NMS生理功能提供了实验资料。