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为了初步探索卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)是否具有免疫作用,本研究在制备了PPP的基础上,考察了PPP对小鼠体内外免疫功能的影响,并初步分析PPP影响机体免疫功能的机理。本研究包括以下三个试验。试验一,PPP的制备。本试验首先从鸡蛋黄中提取卵黄高磷蛋白(PV),经胰蛋白酶水解,水解液经截留分子量3 kDa和1 kDa的超滤膜超滤,取分子量在1 kDa-3 kDa之间的截留液冷冻干燥得到PPP。经SDS-PAGE电泳测PV的纯度,用N/P(摩尔比)检测PPP的磷酸丝氨酸残基密度。结果表明:所制备的PV样品与纯品电泳模式相近,在1 kDa-3 kDa范围内存在PPP电泳条带,且N/P比例为5.02。说明所提取PV样品相对较纯,PPP样品含有磷酸丝氨酸残基。试验二,PPP对小鼠体外免疫功能的影响。为了评价PPP对细胞增殖、吞噬功能、细胞因子以及免疫球蛋白生成的影响,分离小鼠的脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞并进行培养。结果显示:添加LPS或ConA后,显著地促进了细胞的增殖、细胞吞噬功能、细胞因子的分泌以及免疫球蛋白的生成(p＜0.05)。终浓度为0.02 mg/mL的PV组不能显著地影响细胞功能(p＞0.05)。然而,终浓度为0.02 mg/mL的PPP组和0.1 mg/mL PPP组显著地提高了刺激指数(SI)和吞噬指数(PI),以及IgA、IL-1β、IL-2和IL-6的生成。LPS或ConA诱导组比无丝裂原组刺激作用显著增强。结果表明,PPP显著提高了SI、PI、细胞因子以及免疫球蛋白生成的影响,无丝裂原组相比,LPS或ConA诱导下,以上各指标均显著提高。试验三,PPP对小鼠体内免疫功能的影响。为了确定胃饲PPP对小鼠免疫功能的影响,将48只小鼠随机分到3个处理中,每个处理设4个重复,每个处理的小鼠在基础日粮的基础上分别隔天灌胃0.2mL生理盐水(对照组)、PPP和PV溶液,按体重喂给0.03mg/(g·d)。14天后取样确定小鼠的生长性能和免疫功能。结果显示:与对照组和PV组相比,PPP组小鼠的体增重极显著提高(p＜0.01),血清总蛋白、白蛋白、球蛋白和葡萄糖均升高,但差异不显著(p＞0.05),而血清尿素氮、总胆固醇和甘油三酯呈下降趋势,脾脏指数和胸腺指数呈显著提高(p＜0.05)。PPP组的SI和PI显著提高(p＜0.05),血清和脾淋巴细胞培养液中的IgA、IL-2和IL-6浓度,以及血清和腹腔巨噬细胞培养液中的IL-1β均显著地上升(p＜0.05)。PV组与对照组相比,这些指标均无显著变化(p＞0.05)。在LPS或ConA诱导下,培养液上清中的SI、PI、IgA、IL-1β、IL-2和IL-6均有显著的提高(p＜0.05)。结果表明,胃饲PPP不仅提高了体增重,脾脏指数和胸腺指数,还显著增强了小鼠SI和PI,血清和脾淋巴细胞培养液中的IgA、IL-2和IL-6浓度,以及血清和腹腔巨噬细胞培养液中的IL-1β浓度。与无丝裂原组相比,LPS或ConA诱导组以上各指标均显著提高。综合以上各试验可看出,制备所得的PPP不仅提高了小鼠的生长性能,还增强了小鼠体内外免疫功能。