西藏绿萝花活性成分提取及对α-糖苷酶抑制作用的研究

来源 :广东工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lvyuxuan3652008
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糖尿病是一组由遗传因素及环境引起的临床综合症,是一种严重危害健康的常见慢性终身疾病,并且随着人们生活水平的提高,糖尿病等非传染疾病呈流行趋势,而且发病率呈现出年轻化趋势,成为21世纪人类健康的主要威胁之一。所以,糖尿病的积极预防和治疗对于人类的健康是有着非常重要的意义的。 西藏绿萝花为天南星科植物,产于西藏寒冷地带,喜马拉雅山脉,据记载,西藏绿萝花主治糖尿病、冠心病、高血压、高血脂、血管炎、脉管炎等。西藏当地居民通常将绿萝花作为治疗糖尿病、高血脂等慢性疾病的药物,泡水饮用。但是目前还没有西藏绿萝花的相关参考文献及研究报告。本文对西藏绿萝花的研究内容包括:绿萝花微波提取的工艺条件、绿萝花提取物的各个部分在体外对α-葡萄糖苷酶抑制作用以及对酶促动力学的研究,并且研究了绿萝花提取物对小鼠餐后血糖的影响。 首先,在对绿萝花微波提取工艺条件的研究中,考察了微波功率、提取时间和液料比对微波提取的影响,得到以下结论,在微波功率为450W、液料比为20、提取时间为12min的条件时,为最佳提取条件,此时,提取率到达20.9%,并且乙醇全提物浓度为0.8mg/ml时,对α-葡萄糖苷酶抑制率达到67.09%。直接加热提取,提取时间为90min,液料比为30时,提取率为18.95%,并且乙醇全提物浓度为0.8mg/ml时,对α-葡萄糖苷酶抑制率为54.27%,微波提取与直接加热提取方法比较,微波提取明显优于直接加热提取的效果。 其次,在对绿萝花提取物的各个部分在体外对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究中发现,绿萝花70%乙醇提取物、PF相、EAF相、nBF相、WF相在配置成浓度为0.25mg/ml时,对酶的抑制率分别为:47.47%、20.16%、83.65%、11.53%、13.81%。阿卡波糖浓度为0.25mg/ml时对酶的抑制率为50.12%,与之相比,绿萝花的乙酸乙酯相的抑制率明显高于阿卡波糖。因此,进一步研究绿萝花乙酸乙酯萃取部分(EAF),在研究EAF相对酶的活性抑制作用发现,其对α-葡萄糖苷酶的抑制效果随着乙酸乙酯部分浓度的增加而增强,α-葡萄糖苷酶的抑制率对EAF样品浓度具有依赖性,且半数抑制浓度IC50为43.63μg/ml。在研究EAF对α-葡萄糖苷酶抑制作用的动力学实验中发现,绿萝花的EAF部分浓度的改变不改变酶促反应的最大反应速度(Vmax),只影响米氏常数(Km),确定其抑制类型为竞争性类型,并且得到米氏常数Km为0.1612μg/ml,EAF对酶的抑制常数(Ki)为21.49μg/ml。 最后,在对绿萝花提取物的各个部分对小鼠餐后糖耐量的研究中发现,在对小鼠进行蔗糖灌胃后,血糖浓度在30min后达到最高值,60min后下降,120min后血糖浓度达到平稳。蔗糖+EAF组、蔗糖+nBF组,蔗糖+WF组和蔗糖+全提物组,在分别灌胃后30nun后,测得的血糖数据通过T值检验,与蔗糖组相比,P值分别为:pa=0.004<0.01;pb=0.001<0.01;pc=0.103>0.05,pd=0.01<0.05,除了蔗糖+WF组外,其它组与蔗糖组比较,都具有显著性的差异,对降低餐后血糖浓度,血糖的上升有一定的抑制作用。
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