顶复门模式生物——刚地弓形虫具有宿主来源广泛、不同细胞适应性强和增殖速度快等特点,严重威胁着人和动物的健康。弓形虫在胞外活跃的运动形式与胞内静止状态的相互转化过程中,伴随着虫体胞质钙信号的动态变化过程。钙调蛋白（Calmodulin,CaM）是一种在真核生物中高度保守的Ca2+结合蛋白,弓形虫基因组仅编码一个与人源CaM序列高度同源的蛋白,使弓形虫成为研究CaM生物学功能的良好模型。然而,对于CaM在弓形虫生长发育中的功能,仍然知之甚少。本研究利用四环素调控系统构建CaM条件性敲除虫株,开展了相关功能研究。随后,利用Bio ID生物素标记技术,鉴定了CaM在弓形虫速殖子阶段的互作蛋白。相关研究的结果如下:（1）CaM在弓形虫速殖子中的定位使用兔源CaM多克隆抗体确定CaM分布于速殖子的前后两端、胞质、细胞核和细胞核前端的区域。随后,使用弓形虫条件性敲除虫株中位于CaM蛋白N端的Ty标签和回补虫株中位于CaM蛋白C端的HA标签,进一步确认了CaM在速殖子的定位。（2）速殖子阶段CaM的功能研究研究发现CaM的缺失严重抑制速殖子的复制、入侵和逸出能力。CaM的缺失导致速殖子尾部收缩异常,尾部形态畸变和纳虫泡内虫体空间排列杂乱无章。本研究发现CaM缺失,引起弓形虫的顶质体丢失和速殖子分裂过程中子代朝向异常,可能是导致弓形虫死亡的直接性原因。CaM与肌球蛋白F（Myosin F,Myo F）共定位于顶质体周围和速殖子的尾部,CaM缺失影响了参与顶质体遗传的Myo F的定位。Myo F拥有的IQ基序是潜在的CaM结合位点,据此推测CaM可能通过Myo F参与弓形虫顶质体的遗传。针对弓形虫CaM的Ca2+结合位点进行的突变实验说明,Ca2+结合能力对于弓形虫CaM生物学功能的发挥起着关键作用。（3）Bio ID生物素标记技术鉴定CaM临近互作蛋白通过外源添加生物素,标记CaM-Bir A*的临近互作蛋白,接着使用链霉亲和素磁珠特异性富集生物素化蛋白。通过高分辨率LC-MS/MS技术,共鉴定到313个弓形虫蛋白是CaM的潜在互作蛋白。这些临近互作蛋白在速殖子中广泛分布,表明CaM在弓形虫速殖子阶段生物学功能具有多样性和复杂性。随后,转录组与蛋白互作组的联合分析表明,CaM在弓形虫Ca2+信号传递过程中发挥着关键作用。综上所述,本研究揭示了CaM在弓形虫速殖子阶段的重要作用,CaM参与速殖子尾部的收缩和尾部形态的维持,影响速殖子在纳虫泡内的规律性排列。Ca2+结合能力对于CaM在速殖子阶段的功能很关键。Bio ID生物素标记技术,共鉴定出313个弓形虫蛋白在速殖子阶段与CaM相互作用。CaM可能通过Myo F参与弓形虫的顶质体遗传。本研究为揭示CaM在弓形虫和其他真核细胞中的生物学功能奠定了基础。