VEGF、bFGF在急性白血病中的表达及VEGF特异性反义寡脱氧核苷酸对HL-60细胞生长的影响

来源 :中国人民解放军第四军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hunterpo
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目的 急性白血病患者骨髓微血管密度(MVD)显著增高,为了更好地理解MVD、成血管因子及白血病细胞生物学特性三者间的相互关系,本课题拟研究急性白血病患者血清及白血病细胞株培养上清中血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达水平及VEGF特异性反义寡脱氧核苷酸(ASODN)对HL-60细胞生长的影响。方法 收集32例急性白血病患者与10例健康者血清及5种白血病细胞株(HL-60、U937、NB4、JM和K562)培养上清,夹心ELISA法分别测定VEGF、bFGF浓度,为了消除血小板、细胞数对测定值的干扰,将VEGF浓度经血小板数或细胞数标化,最终以pg·mL-1/106PLT、pg·mL-1/105细胞作为评估指标单位;急性髓系白血病细胞株HL-60经不同浓度VEGF ASODN作用后,利用噻唑蓝、ELISA法分别测定靶细胞的生长状态及其VEGF分泌受抑程度。结果 ①急性白血病患者及健康者血清VEGF标化值分别为(20.43±8.32)、(0.99±0.27)pg·mL-1/106PLT,二者相差显著(P<0.05);②除U937外,其余4株白血病细胞株培养上清中均有VEGF表达,其浓度范围为(91.19~260.98)pg·mL-1/105细胞;③在32例急性白血病患者中,14例可检测到bFGF的表达,其阳性率为37.5%,明显高于对健康对照者(10%)(P<0.01);④在5株白血病细胞株中,仅U937和K562细 第四军医大学硕士学位论文一胞上清中检测到了bFGF表达;⑤经0.125刀.5、l及5umOIL’VEGFASODN作用 24h后,HL七0细胞存活率分别降至对照的 77.8%土 1.2%(P>0刀5 VSCOfltrol)、61.l%士0.6%(P<0.05 <S COOtrol)、30.9%士0.9%(P<0.05 <SC。ltf。l)和22.7%土1*%(p<0*5 VS COfltr。l);经0.l、1、5、20umol .LJVEGFASODN分别作用 HL60细胞24h后,细胞培养上清中 VEGF浓度分别为(16.33土3.56)、(91.41土7.24)、(43* 土0.98)、(35.23土1.24)pg·InL-‘/10“细胞,后三者与对照(174.98土4.14冲g·InL‘八’细胞相比均有明显降低(P<0刀5)。结论①急性白血病患者血清***F、旺*F水平较健康人有明显升高;②部分白血病细胞株自分泌一定水平VEGF、bFGF;③VEGF可能是白血病骨髓微血管生成的主要正调控因子;④VEGF ASODN可以通过下调VEGF表达而特异地抑制HL-60细胞生长。
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