目的:研究熊果酸对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其自噬相关蛋白LC3、Beclin-1及P62表达的影响,为临床应用熊果酸改善非小细胞肺癌的治法提供实验依据。材料与方法:采用不同浓度熊果酸(10、20、30、40、50μmol/l)培养人肺腺癌A549细胞,于12h,24h,48h采用CCK8法检测熊果酸对人肺腺癌A549细胞增殖的影响,并确定最佳给药浓度和时间;将人肺腺癌A549细胞株分为3组,即空白对照组组、熊果酸组、熊果酸与抑制剂组,依次用完全培养基、熊果酸、熊果酸加3-MA干预,各组细胞株培养24h后,采用倒置显微镜观察人肺腺癌A549细胞形态学变化;实时荧光定量PCR法(RT-PCR)检测各组细胞株自噬相关基因LC3、Beclin-1及P62的表达;免疫蛋白印迹法(WB)检测各组细胞株自噬相关蛋白LC3、Beclin-1及P62的表达。结果:1.CCK8法结果表明,不同浓度熊果酸在12h,24h,48h作用于细胞后,均对A549细胞的增殖有明显抑制作用,且这种抑制作用呈明显的剂量依赖性和时间依赖性;且与熊果酸组相比,加入自噬抑制剂后,自噬抑制剂显著提高了熊果酸对A549细胞的抑制作用(P<0.01)。2.倒置显微镜观察人肺腺癌A549细胞形态学变化,空白对照组,人肺腺癌A549细胞贴壁生长,状态良好,细胞间紧密连接;细胞呈多角形或短梭形,胞体舒展,形态一致,边界清楚。与空白对照组相比,熊果酸组细胞形态逐渐发生变化,细胞较少,散在分布,细胞间排列稀疏,部分细胞变为圆形或椭圆形。加入自噬抑制剂后,熊果酸与3-MA联合作用后,细胞进一步减少,细胞间排列稀疏,细胞形态明显改变。3.与空白对照组相比熊果酸可诱导A549细胞自噬发生,诱导自噬相关基因LC3、Beclin-1表达的增加;P62表达降低(P<0.01);与熊果酸组相比,抑制剂组自噬相关基因LC3、Beclin-1表达明显降低;P62表达明显增加(P<0.01)。4.与空白对照组相比熊果酸可诱导A549细胞自噬发生,诱导自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1表达的增加;P62表达降低(P<0.01);与熊果酸组相比,抑制剂组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1表达明显降低;P62表达明显增加(P<0.01)。结论:熊果酸具有抑制人肺腺癌A549细胞增殖的作用,其机制可能与调节自噬相关LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1及P62蛋白表达相关。