目的:肿瘤干细胞是肿瘤化疗失败的根源。在乳腺癌、肺癌及结直肠癌中，研究表明化疗可以富集肿瘤干细胞。然而化疗富集肿瘤干细胞的机制并不明确。CD133分子作为分离肿瘤干细胞的常用标记，已在大量实体瘤中被证明。CD133+肝癌细胞已被证实具有肝癌干细胞的生物学特性。化疗能否富集肝癌干细胞，目前研究报道较少。我们主要探讨化疗能否富集肝癌干细胞(CD133+肝癌亚群细胞)并初步分析其调节肝癌干细胞的分子机制。　　 方法:采用紫杉醇(Paclitaxel，PTX)药物大剂量冲击间歇诱导法建立稳定的多药耐药细胞(Huh7.5.1/PTX)。CCK-8试验检测耐药细胞及其亲本细胞的药物敏感性。Western Blot(WB)和流式细胞术(FCM)检测亲本细胞、耐药细胞及TGFβ1、TGF-β1中和抗体、Smad3特异性抑制剂(SIS3)作用后的Smad3活性及CD133的表达变化。　　 结果:历时6个月建成Huh7.5.1/PTX细胞株，其对PTX高度耐药，耐药指数为15.70，且对顺铂、5-氟尿嘧啶、阿霉素、丝裂霉素及吉西他滨等化疗药物有不同程度的交叉耐药性。FCM结果显示Huh7.5.1/PTX细胞相比亲本细胞具有更高的CD133+细胞比列(69.9％vs19.4%，p＜0.01)：TGF-β1作用Huh7.5.1后CD133+细胞比例增加(35.3%vs18.6%，p＜0.01)，加入SIS3作用后CD133细胞比例减少(15.5%vs35.3%，p＜0.01)：SIS3作用Huh7.5.1和Huh7.5.1/PTX细胞后CD133+细胞出现明显的减少(11.9%vs18.6%，p＜0.05；29.9%vs69.3%，p＜0.01);TGF-β1中和抗体作用Huh7.5.1/PTX细胞后CD133＇细胞比例减少(39.5%vs53.6%，p＜0.01)。WB结果证实了FCM的结果，显示Huh7.5.1/PTX细胞相比原代细胞高表达CD133、TGF-β1及磷酸化的Smad3表达增加；TGF-β1作用Huh7.5.1后CD133表达增加，SIS3作用后CD133表达降低；SIS3作用Huh7.5.1和Huh7.5.1/PTX细胞后CD133表达降低；TGF-β1中和抗体作用Huh7.5.1/PTX细胞后CD133表达降低。　　 结论: Huh7.5.1/PTX细胞具有多药耐药性。多药耐药的Huh7.5.1/PTX细胞富集了肝癌干细胞（CD133+肝癌细胞），其机制可能是通过激活TGF-β1/Smad3的活性。