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目的:本实验通过研究平喘宁对寒哮大鼠肺组织中PI3K-Akt/PKB信号传导通路中的相关蛋白的干预来探讨哮喘气道重塑的相关作用机制。采用免疫组化、RT-q PCR等方法检测寒哮大鼠肺组织中的P85、m TOR、ASK1、Caspase8、TSC1的表达量以及平喘宁对其表达量的影响,探讨平喘宁对延缓和改善寒哮大鼠的气道重塑的相关机制。方法:1.选用105只周龄在6-8周,体重在180-230g之间的SPF级健康的雄性SD大鼠。大鼠采购于安徽医科大学实验动物中心,运用随机方法将大鼠分成15只每组的共计7个组别,分别是正常组、模型组、平喘宁高剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁低剂量组、桂龙咳喘宁组以及地塞米松组。2.大鼠先进行1周适应性饲养后,在第1d、第8d对每只大鼠腹腔注射1ml的悬液(此悬液由生理盐水及10%的卵蛋白构成)令其致敏,其中正常组以1ml的生理盐水替代此悬液进行腹腔注射。3.自第15d开始对除正常组外的其余6组大鼠进行1周的连续雾化过敏,制备寒哮模型,具体操作如下:使用装有1%卵蛋白悬液的超声雾化机对大鼠进行超声雾化30min,并且每天对大鼠予以相同时间的寒冷刺激。然后自22d开始对大鼠进行灌胃给药(药量依据大鼠和人的体表面积换算得出),维持4周,其中正常组和模型组予以同等方法得出的生理盐水进行灌服。4.连续灌胃给药28d后,予以卵蛋白对大鼠进行最后一次激发,并在激发后的2h内,解剖大鼠,取出肺组织,将大鼠左肺置于福尔马林中固定,右肺置于-80℃冰箱中冻存。采用HE染色法观测实验大鼠肺组织的病理改变,采用免疫组化法检测肺组织中P85、m TOR的表达;采用RT-q PCR检测ASK1、TSC1、Caspase8的表达量。结果:HE染色后,相比于正常组,模型组大鼠支气管结构发生改变,可见多种炎性细胞浸润、粘液栓及脱落的支气管上皮细胞,气管平滑肌增生明显,黏膜褶皱增多,管腔出现狭窄。其余5个药物组大鼠气道重塑相较于模型组均有不同程度的改善。RT-q PCR检测:相较于正常组,其余六组的ASK1、Caspase8的表达量均升高(P<0.01),其中模型组上调幅度最为显著(P<0.01);对比于模型组,各药物组均有所下降(P<0.01),其中平喘宁高剂量组中ASK1与Caspase8的表达量较地塞米松组与桂龙咳喘宁组下降明显(P<0.01)。相较于正常组,其余六组TSC1的表达量均下降(P<0.01),其中模型组下降幅度为显著(P<0.01);与模型组相比,各药物组TSC1的表达量均有所上升(P<0.01);平喘宁高剂量组对TSC1的表达量的上调优于地塞米松组与桂龙咳喘宁组(P<0.01),而此二组对TSC1表达量上调又高于平喘宁中、低剂量组(P<0.01)。免疫组化法检测:相较于正常组,其余六个组p85的表达量均有不同程度的下降(P<0.01),其中模型组中的p85表达的下调最为显著(P<0.01);与模型组相比,其余五个药物治疗组p85的表达均有所升高(P<0.01);其中平喘宁高、中剂量组对p85的表达的上调大于地塞米松组与桂龙咳喘宁组(P<0.01),而此二组对p85表达的上调又高于平喘宁低剂量组(P<0.01)。相较于正常组,其余六个组m TOR的表达均有所上升(P<0.01),其中以模型组中m TOR表达的上升最为明显(P<0.01);与模型组相对比,其余五个药物组,m TOR的表达均有不同程度的下调(P<0.01);其中平喘宁高、中剂量组对m TOR的下调的表达优于地塞米松组与桂龙咳喘宁组(P<0.01)。结论:平喘宁可以通过对寒哮大鼠PI3K-Akt/PKB信号传导通路中的P85、m TOR、ASK1、TSC1及Caspase8调节进而减缓寒哮大鼠的气道炎症反应,减低气道的高反应性,并能够缓解气道重塑达到哮喘治疗的效果。