团头鲂源嗜水气单胞菌拮抗菌的筛选及拮抗特性研究

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本研究采用纸片法分离筛选拮抗菌,筛选到生防效果优良的菌种,并确定其生物学分类地位。研究了拮抗菌株的生物安全性,并对拮抗菌进行了鱼体的拮抗实验和保护力的测定。得到了如下的结论:1、利用纸片法,对在LB培养基、TCBS培养基和麦康凯培养基上初步分离的131株单克隆菌株进行拮抗菌的筛选,得到5株对致病性嗜水气单胞菌具有拮抗作用的菌株。2、在体外通过对抑菌谱、共凝集率及在共培养条件下对致病性嗜水气单胞菌的抑菌效果的测定,筛选出5株嗜水气单胞菌优势拮抗菌,分别为S13、S18、S24、S25和F4。其中拮抗菌S18、S24、F4在各方面指标均为良好,有进一步开发为水产益生菌的潜在价值。3、对优势拮抗菌S18、S24、F4进行形态特征、生理学特性以及16SrRNA、 gyrB基因的序列测定,鉴定三株优势拮抗菌为解淀粉芽孢杆菌。4、对解淀粉芽孢杆菌S24进行鱼体试验,毒性试验表明拮抗菌S24对供试团头鲂是安全的,不产生毒性反应;免疫保护力试验发现,拮抗菌S24在饲料中的添加浓度为107CFU/kg时,受免团头鲂获得的免疫保护率为60%;鱼体内荧光蛋白标记的致病性嗜水气单胞菌拮抗的试验,得到与体外一致的抑菌效果。综上所述,拮抗菌S18、S24、F4作为嗜水气单胞菌拮抗菌,为嗜水气单胞菌生物防治提供了三株生防效果优良的菌株。通过对拮抗菌S24体内、体外对嗜水气单胞菌的拮抗性能研究、安全性检测、保护力研究表明拮抗菌S24的生防效果显著,安全无毒,具备商品化的应用潜质,为其在水产病害防治方面的应用奠定了基础。
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