磁性高分子微球一般是指内部含有磁性金属或金属氧化物的超细粉末而具有磁响应性的高分子微球,近年来磁性高分子微球在生物医学、细胞学及生物工程等领域的应用受到越来越广泛的关注。漆酶（EC 1.10.3.2）是一种多铜氧化酶,漆酶在造纸工业、有毒化合物的生物消除、生物检测及食品工业等方面具有重要应用价值。酶固定化技术是实现酶重复连续使用和稳定性改善的有效手段,而磁性微球与其它载体相比,更利于分离和回收,因此本文利用磁性聚苯乙烯微球对分离纯化的漆酶进行了固定化研究,确定了漆酶固定的最适条件,并研究了游离漆酶和磁性固定化漆酶间酶学性质的差异,最后还对磁性固定化漆酶在苹果汁除酚和染料脱色中的研究进行了探讨。主要实验结果如下: 1.本实验将粗毛栓菌诱变株粗酶液经硫酸铵沉淀、葡聚糖G-75凝胶过滤层析对漆酶进行分离纯化,最终得到电泳纯的漆酶,经纯化的漆酶的比活力为48.8U/mg,纯化了2.94倍。 2.以磁性聚苯乙烯微球为载体,以戊二醛为交联剂,制备出了磁性固定化漆酶。研究表明:漆酶的最适固定化条件为:在pH3.6条件下,5%戊二醛活化100ul磁性微球（20mg/ml）6h后,加入0.3ml漆酶（0.3mg/ml）固定8h。在此条件下获得的固定化漆酶经测定其酶活力为888.8U/g微球,其比活力为17.6U/mg,酶活回收率为36%。与游离酶相比,固定化漆酶与底物亲和力增大,稳定性增强:固定化酶的K_m值较游离酶小,最适温度与游离酶均为60℃,最适pH较游离酶下降0.4个单位,热稳定性、pH稳定性和贮存稳定性均较游离酶有所提高。Fe²⁺、Hg²⁺、Cr³⁺对固定化酶有抑制作用,Cu²⁺对固定化酶有激活作用。抑制剂EDTA、DMSO对磁性固定化酶的抑制作用明显较游离酶小。 3.因此本实验对磁性固定化漆酶在苹果汁中应用进行了研究。研究表明:磁性固定化漆酶去除苹果汁多酚的最适温度为40℃,磁性固定化漆酶在40℃条件下处理2小时后,苹果汁中多酚含量减少20%,而酶活力没有变化,实验中还发现在苹果汁除酚过程中,固定化酶较游离酶有更强的稳定性,这也进一步证明固定化漆酶在苹果汁的工业化生产上具有广阔的前景。 4.本实验利用磁性固定化漆酶对孔雀绿、结晶紫、甲基橙、甲基红和次甲基蓝五种有机染料进行了脱色研究,实验表明:固定化漆酶对前4种染料都有不同程度的脱色作用,小分子化合物ABTS[2.2-连氮-双（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）]对染料的脱色有明显的促进