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过氧化氢和葡萄糖是生物体系中重要的化学物质,影响着细胞功能和新陈代谢,与生命体的健康息息相关,因此如何快速检测生命体中过氧化氢和葡萄糖的含量,对于环境科学、生命科学以及临床医学都有着重要的意义。本论文在深入探究了以上两种物质研究现状的基础上,开发了一种简单、方便、灵敏的检测方法。化学发光分析因为其灵敏度高、分析速度快、容易实现自动化和连续分析及仪器设备便宜简单等特点,吸引着很多分析工作者的关注,已被成功的应用于药学、临床医学、分子生物学、生物技术和环境监测等领域中。具体内容如下: 1、以C-18修饰的多孔二氧化硅为基质,利用涂覆法将CPPO和红荧烯固定于多孔硅球的表面,得到化学发光探针。由于多孔硅球表面的C-18长链烷烃基团为强疏水物质,为CPPO和红荧烯提供了疏水的环境,使CPPO和红荧烯分子能在微球表面结合牢固。三嵌段多聚物Pluronic F-127(PF127)将疏水探针分散于水溶液中,使其具有亲水性能,有利于生物样品的检测。多孔硅球的比表面积大,提高了过氧化氢与发光试剂的接触面积,从而提高了该探针的工作效率。利用该探针对过氧化氢和葡萄糖进行了检测,过氧化氢浓度在10-6 mol/L—10-3 mol/L范围内与化学发光信号呈线性关系,线性范围宽,可达4个数量级。葡萄糖浓度在10-4 mmol/L—5 mmol/L范围内与化学发光信号呈很好线性关系,线性范围宽,适合于体内葡萄糖含量的检测。 该探针有效克服了过氧化草酸酯化学发光体系亲水性能差的缺点,并且在多孔硅球表面有效富集了发光活性物质,减小了CPPO和红荧烯的距离,提高了两者之间的能量转化效率,因此该探针具备生物兼容性好、发光效率高、强度大、寿命长等优点。 2、通过涂覆法制备得到了表面负载 CPPO和红荧烯化学发光活性物质的探针,利用疏水作用将葡萄糖氧化酶固定到该多孔硅球的表面,形成了固定化酶葡萄糖化学发光探针。使用该探针进行葡萄糖含量的测定,初步得到了比较满意的结果。