4周硝酸钠补充对一次性力竭大鼠趾长伸肌CHOP及其下游蛋白表达的影响

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研究目的:本研究通过4周硝酸盐补充,观察一次性力竭运动后大鼠趾长伸肌内质网应激介导细胞凋亡相关指标的变化,为外源性硝酸盐补充改善运动损伤的机制提供实验依据。研究方法:40只8周龄雄性SD大鼠随机分为安静对照组(C组)、运动对照组(EP组)和运动灌喂组(EN组),选用硝酸钠(sodium nitrate,Na NO3)作为外源性硝酸盐进行灌喂,再根据灌喂浓度的不同将EN组分为运动低剂量Na NO3组(ELN组)、运动中剂量Na NO3组(EMN组)和运动高剂量Na NO3组(EHM组),每组8只共5组。适应性饲养三天后称重,根据大鼠体重进行每日灌喂,ELN组、EMH和EHN组Na NO3补充浓度分别为25.5 mg/kg BW/天、59.5mg/kg BW/天和85.0 mg/kg BW/天,C组和EP组灌服同等剂量的生理盐水,补充时间持续4周。Na NO3补充结束后次日,进行一次性力竭离心跑台训练,坡度-16°,速度16m/min,运动至力竭并记录时间。运动结束后24h进行取材,取血液、趾长伸肌待测:制作趾长伸肌石蜡切片和HE染色,观察趾长伸肌组织形态结构的变化;比色法检测血清样本中NO、NO2-、CK、Mb、趾长伸肌NO浓度;蛋白质印迹法检测骨骼肌CHOP、DR5、Caspase-3的蛋白表达情况。研究结果:(1)4周Na NO3补充可以显著延长大鼠一次性力竭运动时间,效果随剂量增长而提高,59.5 mg/kg BW/天和85.0 mg/kg BW/天剂量组效果最显著。(2)4周Na NO3补充可以显著提高大鼠血清NO、NO2-水平,提高趾长伸肌NO浓度,剂量越高效果越显著,85.0 mg/kg BW/天剂量组效果最显著。(3)4周Na NO3补充可以显著降低大鼠一次性力竭后24h血清CK活性和Mb的含量,缓解大鼠趾长伸肌损伤程度,效果随剂量增长而提高,85.0 mg/kg BW/天剂量组效果最显著。(4)大鼠一次性力竭运动后24h趾长伸肌CHOP、DR5、Caspase-3的表达非常显著上调。4周Na NO3补充可以显著下调大鼠一次性力竭运动后24h趾长伸肌CHOP、Caspase-3的表达,效果随剂量增长而提高,85.0 mg/kg BW/天剂量组效果最显著;对DR5的表达无影响。研究结论:4周硝酸盐补充可以提高大鼠体内NO的可利用水平,通过下调CHOP和Caspase-3的表达来改善趾长伸肌的损伤情况,提高大鼠运动表现。
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