细胞周期素A(cyclinA)对白血病细胞增殖调控的临床及实验研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:itowna
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
细胞周期素A(cyclinA)是细胞周期的一种正性调节因子,是人类cyclins家族中的一个主要成员,它首先是在原发性肝癌细胞中与HBV DNA整合部位上检测到的,并认为这种整合作用有致癌性。cyclinA在DNA合成前的G1晚期出现,存在于细胞核内,作为调节亚基与相应的催化亚基—细胞周期素依赖性激酶(cyclins dependent kinases,CDK)中的CDK2、CDC2结合,参与细胞DNA复制、合成,并促进细胞进入有丝分裂,是细胞越过并顺利完成S期、G2/M期等各程序所必须的因子,它的正常表达代表正常的细胞增殖活性。 若cyclinA异常表达,则使错配或合成不完整的DNA丧失修复时间而直接进入细胞周期引起异常的细胞增殖,是肿瘤发生的原因之一。目前认为cyclinA在多种肿瘤中有异常高表达,而且是肿瘤细胞恶性增殖及预后不良的指标。对于cyclinA在白血病患者中的表达及其作用国内外的报道不多,仅认为cyclinA在白血病细胞中有高表达并且与细胞的S期及G2/M期细胞所占的比例有明显的正相关性,是白血病细胞增殖的一种新的指标,可能对判断预后有帮助。因此我们的实验通过探讨cyclinA在急慢性白血病患者中的表达,希望明确其在白血病发病过程中所起的作用,与其他细胞周期调控因子(cyclinA1、cyclinB1、cyclinG1及P21cipl)之间的关系,了解其表达异常与临床白血病患者的分型、分期及预后(复发、耐药、缓解)的关系:希望为临床诊断、化疗药物的选择及判断预后提供帮助。 反义核酸技术是利用反义RNA抑制或封闭目的基因的表达,现该技术已被广泛应用于肿瘤及遗传性疾病的研究之中,它可通过封闭特异的癌基因达到基因导向治疗肿瘤的目的。cyclinA在白血病细胞中有高表达是众所周知的,我们希望设计一个特异的cyclinA反义脱氧寡核苷酸(antisense oligodexynucleotide,ASON)封闭cyclinA的表达,探讨cyclinA ASON对体外培养的白血病细胞增殖、凋亡的调控作用,并用 中文摘要脂质体转染提高细胞内摄取反义核酸的浓度,比较两种导入方法的抑制效率,选取效率高的导入方法在体内进行裸鼠成瘤实验进一步证实其功能,从分子水平揭示CyClinA对白血病细胞恶性增殖的作用,希望为基因治疗白血病提供一个新的思路。l 细胞周期素A在成人急性白血病思者中的表达与意义 目的 探讨细胞周期素A*yClind)在成人急性白血病(AL)患者中的表达及其临床意义。 方法 采用流式细胞术及 RTICR法对 100例 AL患者及 10例正常人进IT cyclinA、cyclinAI、cyclinBI. cyclinGI、PZlc…蛋白水平及mRNA水平的检测,并对其中cycliM阳性表达的患者的PCR扩增产物进行DNA测序分析。 结果 门)在AL$者中CyClinA蛋白水平在细胞周期中的分布无异常,即 GO/GI期出现,在 S期增加,于 GZ/M期达到高峰,与正常细胞中的CyClinA的分布一致,经测序分析发现CyCliM阳性扩增片段与基因库中的目标完全一致;CyClinA蛋自及InRNA的阳性率 (66.70,59.0O)和中位表达水平(18.50,0.539土 0.990)明显高于正常人T<0刀 1\ Q)CyClinA蛋白表达与其 InRNA水平之间有明显的正相关性(,叩.597,P司刀00L 说明CyClinA基因在转录水平上是可以调控的;臼)CyClinA蛋白及mlLvA水平与S期、GZ/M期细胞所占的比例呈正相关性(P<0刀1人 N)cyclinA蛋白表达与AL $者中外周血WB C计数呈负相关性(,一o.295,P二0.mo人而与患者的年龄、性别、幼稚细胞所占的比例、FAB分型等无关0>0刀5人 u)CyCliM的阳性率及表达水平在初治及复发的AL 患者之间无明显差异 0>0刀5人 但两组患者的cyclinA表达水平均明显高于缓解期AL患者和正常对照组T<0刀1人 对不同FA B分型的*L患者进行分析,发现复发组 ALL患者的CyClinA蛋白表达水平门.4%)明显低于初治组(2.5%)k二 14.418,P二0*22);(6)CyCli帆高表达患者的 CR率 (87.9O,85.7o)明显高于低 表达患者(38.2o,53.3O)(P<0.05),用多因素逻辑回归分析发现cyclinA蛋白、S期及GZ/M期细胞所占的比例、cyclinA mRNA是影响AL患者CR率的独立因素(其相对危险度分别为 10 石3、5.70、4.71;P<0*5);()在 AL患者中,cyclinA与 2 中文摘要 CyClinAI的InRNA表达水平之间无相关关系(,一0刀32,P=0.801* 说明两者在AL中的作用不同,不能相互替代。CyCliMl基因的表达与 AL患者的FAB分型密切相关,即在AML患者中CyClinAI的表达水平 (0.7103士0.7241)明显高于ALL患者(0.2969士0.5358),而且尤其 是在AML(M3)型患者中CyCli“l的表达门.194士0尸357)明显高 于其他FAB分型组o功刀1人CyClind与CyClindl两者同时高表达的 10例患者全部 CR,而两者同时阳性低表达的 5例患者仅一例 CR;抢) CyClinA在AL患者中与
其他文献
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
椭圆、双曲线和抛物线可以统一定义为:与一个定点(焦点)和一条直线(准线)的距离之比等于常数(离心率)的点的轨迹.由于它们的离心率不同,所以这三种曲线的方程在直角坐标系下很难统一,给
在当前市场经济环境下,企业经营过程中经济业务越来越繁杂,这就需要较多的会计工作量,而且当前企业发展过程中对于会计信息的要求也越来越严格。基于这种情况下,企业需要加强
为了探究我国不同品牌卷烟之间游离氨基酸的差异性,进而为中式卷烟品类的构建、凸显卷烟品牌风格提供一定的依据。采用反相高效液相色谱/荧光检测器对16种香烟中的17种游离氨
近年来,恶性肿瘤发病率日益增高,已成为威胁人类健康的第二大疾病。对恶性肿瘤进行化学治疗,其目的是最大限度的杀伤肿瘤细胞。然而,由于多药耐药的存在,常常导致化疗失败,严重影响