【摘 要】
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目的观察益气补肾解毒方对新生大鼠短期灌服MNNG诱发的大鼠胃癌前病变的干预作用及对Th17/Treg平衡的影响,探讨其抗胃癌前病变的作用机制。方法将52只出生3日龄雄性SD新生大
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目的观察益气补肾解毒方对新生大鼠短期灌服MNNG诱发的大鼠胃癌前病变的干预作用及对Th17/Treg平衡的影响,探讨其抗胃癌前病变的作用机制。方法将52只出生3日龄雄性SD新生大鼠随机分为正常组14只,造模组38只。每天上午各乳鼠禁食2h后正常组以生理盐水灌胃0.1ml/只,造模组以800mg/L的MNNG灌胃0.1ml/只,均连续10天;所有大鼠均3周龄断乳和分笼后常规喂养。23周末两组各处理大鼠6只,常规HE染色观察胃粘膜病理变化。剩余造模组32只大鼠随机分为模型组、中药高剂量组、中药低剂量组及叶酸组共4组,每组8只,剩余正常组8只仍为正常组;第24周起,正常组、模型组每天灌服生理盐水10ml/Kg,中药高、低剂量组每天分别灌服25.65 g/Kg、8.55 g/Kg的益气补肾解毒方流浸膏,叶酸组每天灌服3.45 mg/Kg的叶酸,均连续12周后处理大鼠,HE染色光镜观察胃粘膜病理,液相芯片技术检测血清和胃粘膜蛋白提取物IL-17A、IL-10、TGF-β、IL-6水平;qRT-PCR技术检测胃粘膜FoxP3mRNA、RORytmRNA表达。结果①造模23周大鼠可见胃粘膜炎症,半数大鼠出现萎缩和轻度异型增生;35周模型大鼠胃粘膜炎症萎缩加重,不同程度异型增生,2例出现高分化腺癌。模型组大鼠胃粘膜炎症、萎缩及异型增生等较正常组明显增高(P<0.05、P<0.01),不同剂量益气补肾解毒和叶酸组炎症程度、异型增生程度较模型组明显减轻(P<0.05、P<0.01);②模型组大鼠胃粘膜RORytmRNA表达较正常组显著增强(P<0.01),FoxP3mRNA则与正常组比差异无统计学意义(P>0.05),RORytmRNA/FoxP3mRNA比值较正常组明显增高;益气补肾解毒方低、高剂量组及叶酸组RORytmRNA表达、RORytmRNA/FoxP3mRNA比值较模型组明显下降(P<0.05),FoxP3mRNA表达与模型组差异无统计学意义(P>0.05)③模型组大鼠血清和胃粘膜蛋白提取液IL-17A、TGF-β水平较正常组明显增高(P<0.01),益气补肾解毒方高剂量组及叶酸组治疗后IL-17A、TGF-β水平均较模型组有明显的降低(P<0.01、P<0.05),益气补肾解毒方低剂量组IL-17A水平较模型组明显降低(P<0.05),TGF-β水平与模型差异无统计学意义(P>0.05);模型组大鼠胃粘膜蛋白提取液IL-6水平较正常组明显增高(P<0.05),各药物治疗组胃粘膜IL-6水平较模型组明显降低(P<0.05),血清IL-6水平较正常组有增高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),各药物治疗组血清IL-6水平与模型组比差异也无统计学意义(P>0.05);模型组血清和胃粘膜蛋白提取液IL-10水平与正常组比差异均无统计学意义(P>0.05),各药物治疗组与模型组比差异也均无统计学意义(P>0.05)。结论①新生大鼠短期灌服MNNG后常规喂养35周可诱发胃癌前病变;益气补肾解毒方可有效改善胃癌前病变大鼠胃粘膜病理变化,减轻胃粘膜炎症和异型增生。②胃癌前病变大鼠胃粘膜局部微环境异常,促炎因子分泌增多,存在Th17/Treg的免疫失衡。③益气补肾解毒方可以通过调控RORyt、Foxp3等转录因子表达以及炎症因子IL-17A、IL-6、TGF-β的水平,一定程度纠正Th17/Treg失衡,防止胃癌前病变的进展。
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