多巴胺(Dopamine，DA)是中枢神经系统内与运动密切相关的一种神经递质，DA的增多或减少可能导致运动的增强或减弱；多巴胺转运体(Dopaminetransporter，DAT)则是位于多巴胺能神经元突触前膜的一种膜蛋白，它特异性再摄取突触间隙的多巴胺入突触前末梢，从而终止其对突触后神经元的作用，是检测脑内多巴胺能神经体系功能障碍的重要指标之一。酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxylase，TH)是多巴胺合成的限速酶，存在于儿茶酚胺类神经元胞体及神经末梢内，是反映尾壳核多巴胺能神经末梢数量多少的重要标志物之一。　　 近年应用DAT配基放射自显影、配基神经显像技术观察到老年人及老年动物存在纹状体标记信号呈不同程度的降低，提示机体在正常衰老过程中可能存在黑质纹状体多巴胺能神经元的功能障碍，这种功能障碍很可能是机体衰老所表现出运动迟缓及认知功能减弱的神经生物学基础。　　 目的：本研究利用免疫组织化学技术以及免疫印迹方法，观察健康大鼠衰老过程中黑质(substantianigra，SN)和尾壳核(caudateputamen，CPu)DAT和TH免疫反应强度的变化，从而进一步分析衰老对大鼠脑内多巴胺能神经元的影响，以期为相关老年疾病的诊断和治疗提供一定的实验依据。　　 方法：选用3月龄、12月龄和24月龄健康雄性Wistar大鼠60只，由河北医科大学实验动物中心提供。3月龄组大鼠体重(258±14)g，12月龄组大鼠体重(444±31)g，24月龄组大鼠体重(466±55)g。每月龄组大鼠20只，其中各10只用于免疫组织化学和免疫印迹的研究。　　 结果：　　 1免疫组织化学结果(1)一般观察：DAT和TH的免疫反应强标记信号主要分布在中脑黑质和尾壳核。TH免疫反应阳性神经元主要集中在中脑黑质及腹侧被盖区（VentralTegmentalArea，VTA），呈棕褐色，胞体圆形或卵圆形；在黑质和尾壳核可见DAT和TH免疫反应阳性突起存在。与3月龄组和12月龄组大鼠比较，24月龄组大鼠DAT在黑质和尾壳核的免疫反应强度明显减弱，表现为免疫组织化学着色的减弱和免疫阳性纤维的减少；各年龄组TH免疫反应强度在黑质和尾壳核未见明显的改变。　　 (2)DAT免疫组化静态灰度值分析：通过静态灰度值分析发现，3月龄组黑质61.19±5.97，12月龄组黑质63.58±6.90，24月龄组黑质84.23±1.24;3月龄组尾壳核122.2±10.41，12月龄组尾壳核128.53±8.98，24月龄组尾壳核153.00±1.57。24月龄组大鼠尾壳核的DAT灰度值比3月龄和12月龄组增加16％以上，在黑质则增加25％以上，免疫反应强度明显减弱，存在统计学差异（P＜0.05）；3月龄组与12月龄组DAT灰度值在黑质和尾壳核无统计学差异（P＞0.05）。　　 (3)TH免疫组化静态灰度值分析：通过静态灰度值分析发现，3月龄组黑质38.39±1.21，12月龄组黑质38.42±0.87，24月龄组黑质41.96±1.33：3月龄组尾壳核79.72±5.24，12月龄组尾壳核81.65±2.60，24月龄组尾壳核82.65±1.83。经统计学分析3个年龄组大鼠TH灰度值在黑质和尾壳核均无统计学差异(P＞0.05)。　　 2Western-Blot检测结果黑质部DAT与β-actin条带相对吸光度值的比值为：3月龄组0.63±0.01;12月龄组0.62±0.02;24月龄组0.16±0.01。尾壳核部DAT与β-actin条带相对吸光度值的比值为：3月龄组1.33±0.08；12月龄组1.68±0.04;24月龄组0.30±0.01。经统计学分析：3月龄和12月龄组DAT与β-actin免疫印迹条带相对吸光度值的比值在黑质、尾壳核无统计学差异（P＞0.05）；与3月龄和12月龄大鼠相比，24月龄组大鼠DAT与β-actin免疫印迹条带相对吸光度值比值在黑质和尾壳核明显减低，存在显著性差异(P＜0.01)。　　 结论：　　 1.老年大鼠黑质和尾壳核DAT的表达显著降低，表明黑质纹状体多巴胺能神经元的功能减弱，这可能是正常衰老过程中机体运动迟缓及认知功能减退的神经生物学基础。　　 2.老年大鼠黑质和尾壳核TH的表达无显著降低。老年大鼠DAT表达降低、TH表达无明显降低的结果提示DAT较TH更能准确的反映多巴胺能神经元在老年的功能状态。