抑瘤素(OSM)对肝源性细胞体外生长的影响

被引量 : 0次 | 上传用户:songyingling
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
抑瘤素(oncostatin M,OSM)具有抑制多种肿瘤细胞增殖和诱导其分化的生物学功能,OSM诱导后,肿瘤细胞表现出生长抑制,并向成熟细胞形态分化,出现一些正常细胞的生理功能。同时,OSM又能够促进胎肝时期肝脏实质细胞的成熟分化。鉴于OSM在肝脏发育中的重要地位以及OSM对肿瘤生长的调控作用,我们建立了表达OSM的CHO-OSM-EGFP细胞株,以大鼠肝脏来源的干细胞株WB-F344(功能上类似于肝卵圆细胞)与肿瘤细胞株HTC为研究对象,对OSM对肝源性干细胞和肿瘤细胞体外生命活动的影响进行了初步探讨。 本实验中,构建了表达人OSM蛋白基因的真核表达载体pNI-OSM-EGFP。通过双酶切将完整的OSM ORF从pEO质粒中切出,克隆到带绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-N1中,转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),G418筛选后获得多个携带有绿色荧光蛋白的阳性克隆。在荧光镜下对阳性克隆进行标记,无菌操作下,经二次挑选出细胞克隆,并进行扩大培养,在流式细胞术鉴定CHO-OSM-EGFP细胞纯度,RT-PCR鉴定OSM基因在mRNA水平表达的基础上,证实获得了OSM稳定表达细胞株CHO-OSM-EGFP。 分别收集CHO、CHO-EGFP,CHO-OSM-EGFP的细胞上清,取不同浓度的上述细胞上清与大鼠肝癌细胞株HTC和Fischer大鼠肝脏来源的干细胞系WB-F344(功能上类似于肝卵原细胞)共培养,4~7天左右,流式细胞术(FACS)分析结果显示CHO-OSM-EGFP上清在体外能够诱导HTC发生凋亡,对HTC细胞周期各时相细胞分布无影响;当在HTC细胞培养体系中加入终浓度为15%~30%CHO-OSM-EGFP上清时,凋亡比例随着CHO-OSM-EGFP上清浓度的增加而增加,当CHO-OSM-EGFP上清终浓度增大军事医学科学院硕士学位论文至40%,凋亡比例反而下降,同时细胞死亡明显多于对照组。与之相反的是CHO-OSM-EGFP上清能使大鼠肝脏干细胞系阳一F344细胞阻滞于GO-GI期,处于S期和M期细胞比例下调,同时向成熟细胞形态分化,而不产生凋亡作用。本研究结果提示:低剂量OSM可以HTC肿瘤细胞的凋亡,高剂量0训将导致mC细胞死亡;而0规不引起肝脏干细胞阳一四时的凋亡,可诱导其向成熟细胞分化。OSM对肝脏来源干细胞与肿瘤细胞的生物学作用及机制有待于进一步深入研究。
其他文献
目的用DNA重组技术在毕赤酵母中表达多聚组氨酸融合重组乙型肝炎病毒表面抗原S蛋白,与血源乙型肝炎Dane颗粒联合使用,制备乙型肝炎表面抗体酶免试剂盒。方法将S基因插入酵母
作者提出:信息技术课堂应该关注学生的学习动机,采用真实性的驱动问题、协作学习和技术将学生的学习兴趣转换为课程所要求的有意义的、高质量的认知投入,支持并鼓励学生使用
利用金相(OM)、透射电镜(TEM)对7075铝合金热变形显微组织进行了观察.实验表明:在热锻条件下,7075铝合金完全可以发生动态再结晶并通过动态再结晶产生细小的再结晶晶粒.动态
<正> 前列腺炎综合征(Prostatitis Syndrome,PS)迄今对泌尿外科医师仍是一个常见的、混乱的和令人沮丧的临床病症[1],是需要认真关注的研究课题,人们为此经历了漫长的探索历
前言 氟中毒是严重危害人体健康的主要地方病之一。我国是地方性氟中毒的重度流行国家,目前受累人数达1亿多。有关氟中毒的病理机制尚不十分清楚,对氟中毒病人也缺乏有效的
语篇教学是英语教学至关重要的部分。在语篇教学中,通过任务铺设、课前引导,语境创设、课中深入,综合应用、课后实践,可以充分发挥学生的主动性,持续保持兴趣,为以后的学习奠
【正】 戏曲语言,不仅是戏曲艺术风格最外在的表现,而且是戏曲艺术风格的基础。元代,是我国古典戏曲发展的一个辉煌时期,近人王国维在《宋元戏曲史》中说:“元曲之佳处何在?
本文利用浙、粤两省的企业家和公众的问卷调查数据,运用线性概率模型(LPM),分别选取被信任程度(Trustworthy)、信任他人程度(Trusting)和信任的区域歧视(Region Discriminati
近年,我国对于历史文化名镇的重视程度日益增强,相关法规陆续出台,专家学者对其研究也日益深入。但是,虽然历史文化名镇的保护规划已经成为法定规划,但在保护规划中大多是对
<正>1病例资料患者,男,61岁,既往高血压病病史30年,血压最高达180/100mmHg(1mmHg=0.133kPa),现规律应用替米沙坦80mg、琥珀酸美托洛尔23.75mg,1次/d,血压可控制在130/80 mmHg