论文部分内容阅读
目的: 1.观察锌指蛋白A20在HBeAg阴性和HBeAg阳性慢乙肝患者中的表达特点，研究A20与慢乙肝肝损伤的相关性。 2.研究锌指蛋白A20在D-半乳糖胺肝损伤小鼠中的动态变化及当飞利肝宁的调控作用。 方法: 1.205例慢性乙型病毒性肝炎(CH3)病例，其中HBeAg（-）慢乙肝92例，HBeAg(+)慢乙肝113例，留取外周血及肝穿组织标本。正常对照组60例，留取外周血。采用ELISA法检测外周血锌指蛋白A20及TNF-α的表达水平，分析锌指蛋白A20与肝功能及组织炎症损伤的相关性。 2 C57雄性小鼠共90只。选取其中50只，按照体重随机分为0h、2h、6h、12h和24h共5个时间点组，每组10只;除0h组外，其余小鼠腹腔注射D-半乳糖胺造成小鼠急性肝损伤模型，在各时间点取血检测血清ALT、AST、TNF-α、A20的含量;余下40只小鼠按体重随机分为正常组(C)、模型组(M)、当飞利肝宁组(D)、美能组(N)。当飞利肝宁组和美能组分别进行相应药物干预10天，末次给药后，除正常组腹腔注射生理盐水外，其余均腹腔注射D-半乳糖胺800mg/Kg，注射24h后常规检测各组血清ALT、AST水平，用ELISA法检测血清及肝组织匀浆中TNF-α和A20的表达水平，用Western blot法检测肝组织A20表达水平。 结果: 1.所有CHB患者与正常对照组的性别、年龄无显著差异。CHB患者的血清A20的水平显著高于正常人（P＜0.05），CHB患者血清A20水平与ALT、AST的水平成正相关关系（r分别为0.447、0417，P＜0.01）;其中HBeAg(+)CHB患者中血清锌指蛋白A20的水平不仅与ALT、AST水平成正相关关系（r分别为0.558、0.553，P＜0.01），还与肝组织病理炎症分期正相关(r=0.188，P＜0.05)。 2.HBeAg(-)CHB患者与HBeAg(+)CHB患者的性别、年龄无显著差异(P＞0.05)。HBeAg(+)CHB患者的血清ALT、AST、HBV-DNA、TNF-α水平显著高于HBeAg(-)CHB患者(P＜0.05)，两组间肝组织病理炎症比较无明显差异，但血清A20水平在HBeAg(+)患者中显著低于HBeAg（-）患者(P＜0.05)。 3与0h组相比，腹腔注射D-半乳糖胺2h后小鼠血清ALT、AST的水无明显变化，6h-24h阶段血清ALT、AST的水平显著升高(P＜0.05)。在注射2h后血清A20与TNF-α的表达均明显升高（P＜0.05），A20表达水平达到峰值;在6-24h阶段，TNF-α的表达持续上升，而A20的表达逐渐降低，并于24h降至正常水平。 4.腹腔注射D-半乳糖胺24h后，模型组小鼠肝组织有轻度炎症损伤，血清ALT、AST、TNF-α水平及肝组织TNF-α的表达水平与正常组相比显著升高（P＜0.05），血清与肝组织A20水平无明显变化。相对于模型，当飞利肝宁与美能组小鼠血清ALT、AST、TNF-α及肝组织TNF-α的水平均显著降低(P＜0.05)，而血清及肝组织的A20水平显著上调（P＜0.05）。 结论: 1.慢乙肝患者血清锌指蛋白A20的表达水平显著升高，并与肝损伤程度正相关，与HBeAg也有相关性，可能作为一种肝脏炎症和损伤的评价指标。 2.在D-半乳糖胺诱导的小鼠急性肝损伤中，锌指蛋白A20的表达存在动态变化，先快速上升至高峰后又逐渐降低，与炎症反应和肝细胞损伤程度有一定关联。 3.当飞利肝宁可将改善D-半乳糖胺诱导小鼠炎症和肝损伤，通过上调肝脏锌指蛋白A20的表达抑制炎症可能是其保肝作用机制之一，提示A20有可能成为慢乙肝肝损伤治疗的一个靶点。