目的:通过建立柯萨奇B组3型病毒（CVB3）的快速检测方法以及叙利亚仓鼠（Mesocricetus auratus）及恒河猴（Macaca mulatta）感染动物模型,为CVB3病毒的诊断治疗、病理生理、致病机制以及疫苗研发和药物评价等提供参考。方法:本研究分为3个部分,第一部分:CVB3检测体系建立（1）使用柯萨奇B组病毒通用引物,经PCR扩增获取CVB3病毒的VP1基因;（2）构建VP1基因的重组载体,经体外转录获得含有病毒VP1基因的RNA标准品,进而建立荧光定量检测方法;第二部分:叙利亚仓鼠模型构建（1）以106.75CCID50/ml 100μl的感染剂量,通过腹腔注射和鼻腔滴注两种方式感染叙利亚仓鼠;（2）对感染后的仓鼠的临床表现、生理生化、排毒、组织病理损伤情况进行观察记录及检测分析。第三部分:恒河猴模型构建（1）以106.75CCID50/ml 200μl的感染剂量,通过鼻腔滴注方式感染前期筛查到的背景数据良好的3-4月龄恒河猴;（2）对感染后实验猴的临床表现、生理生化、排毒、组织病理损伤、免疫因子及抗体等进行观察记录及检测分析。结果:第一部分:建立的CVB3病毒检测方法具有良好的特异性、灵敏性、重复性,可用于CVB3病毒的快速检测;第二部分:（1）对照组未出现异常临床情况;两个实验组仓鼠在感染第2天起出现不同程度的精神低迷等表现并持续至第8天;从第3天起,两个实验组仓鼠在不同时间点在口唇、脸颊等部位均出现了白色疱疹,疱疹在2-4天内逐渐消退。（2）实验组仓鼠的咽鼻拭子、粪便样本在1-14天中均检测出病毒载量;（3）血清生化结果提示血清心肌酶、肝功能酶在感染后第7天出现升高现象,在感染后第14天回落至正常水平。（4）组织病毒载量检测:实验组仓鼠的心、肝、脾、肺等主要内脏器官、神经组织、消化道组织以及疱疹组织中均检测到了病毒核酸。（5）组织病理和免疫组化检查结果显示,实验组仓鼠的心、肝、脾、疱疹等组织均出现不同程度的病理改变和较多的病毒抗原表达,而对照组仓鼠则未见病理改变以及抗原表达。第三部分:（1）对比感染前,3只实验猴在感染后第3-12天内不同时间点出现了手、足、口唇部疱疹症状。（2）感染后30天内,实验猴未见明显体温升高情况,体重未见明显变化。（3）血常规结果显示白细胞、红细胞、淋巴细胞和中性粒细胞变化提示病毒感染血相特征;生化结果发现LDH、CK、CKMB、AST在感染后总体呈现升高趋势;（4）实验猴的咽鼻拭子、粪便样本在1-21天中均检测出病毒载量;在感染后的第3天和7天出现了典型病毒血症;（5）组织病理和免疫组化检查结果显示,心、肝、脾、疱疹等组织均出现不同程度的病理改变和病毒抗原表达。（6）血浆细胞因子检测发现IL-2、TNF-α、IL-4、IL-6、IFN-γ相对表达量在感染后不同时间点出现变化。（7）在感染后30天,血清中和抗体检测最高可达1:32。结论:（1）本研究建立的CVB3的快速检测方法可进行动物本底快速筛查,并可用于实验室的样本检测,提升了检测效率;（2）通过腹腔注射和鼻腔滴注方式成功构建CVB3病毒感染叙利亚仓鼠和恒河猴的动物模型,其中鼻腔滴注建模方式更真实的反映了病毒引发机体疾病及转归的过程。（3）CVB3感染的恒河猴出现较为典型、类似人的手足口病（HFMD）动物模型,同时动物模型的病理生理结果提示有病毒性心肌炎及肝脏、脑损伤的病理变化。