不同孕龄胎盘和脐带组织中S100b、NSE、GFAP的表达

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目的神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100b、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)是目前研究较多的缺血缺氧性脑损伤的标记物,NSE特异性定位在神经元内,GFAP、S100b主要集中在星形胶质细胞内。在围产医学,主要通过测定羊水、脐血、新生儿血和新生儿脑脊液中这些指标来预测围产儿脑损伤,国外有研究发现S100b和NSE的表达不仅局限于神经系统,胎盘组织也有相应表达。因此脐血和羊水中S100b和NSE的活性是来自于脑损伤还是来自于胎盘或脐带组织的释放?人们对此提出质疑。S100b、NSE和GFAP究竟在胎盘或脐带组织中呈怎样的表达?不同孕周的变化趋势如何?国内外均未见系统研究报道。我们的研究通过系统评价30名不同孕龄的健康产妇胎盘和脐带组织S100b、NSE和GFAP的免疫活性,探讨哪种指标更有希望成为围产儿缺血缺氧性脑损伤的标记物。材料和方法1、试剂NSE、S100b、GFAP一抗、免疫组化试剂盒均由迈新试剂公司提供。2、标本来源组织来自于30名不同孕龄健康产妇的胎盘和脐带(采集标本事先已得到患者和家属的同意),其中28周以下的来自于10个因为胎儿和母体原因流产的产妇,28-36周的来自于10个早产的产妇,36周以上的来自于10名自然分娩的产妇。多胎妊娠、胎儿脑畸形、21三体综合症及感染的除外。分娩后,立刻取胎盘中心的小叶和胎儿侧脐带组织,并固定在10%多聚甲醛待检。3、方法胎盘或脐带组织S100b、NSE和GFAP的检测用免疫组化S-P法,以迈新公司提供的阳性对照片为阳性对照,以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。4、结果判定(阳性细胞数)每张切片随机选6个视野计阳性细胞数,求平均阳性细胞率。5、统计学处理所有结果用平均值±标准差((?)±s)表示,利用SPSS13.0统计学处理软件进行正态检验、方差齐性检验,呈正态分布方差齐后,行单因素方差分析,P<0.05认为在统计学上有显著差异,有显著差异者再进行多重比较。结果1、S100b在不同孕龄胎盘的滋养层细胞、血管平滑肌细胞、肌成纤维细胞、巨噬细胞呈现阳性,在胎盘滋养层细胞的表达有随孕龄增长而增加的趋势。在脐带的血管平滑肌细胞、肌纤维母细胞、羊膜上皮细胞、巨噬细胞和单核细胞染色阳性,表达的强弱在不同孕龄之间无明显差别。2、NSE表达于不同孕龄胎盘的滋养层细胞、血管平滑肌细胞、肌成纤维细胞和巨噬细胞,在脐带的血管平滑肌细胞、肌纤维母细胞、羊膜上皮细胞、巨噬细胞和单核细胞染色阳性,不论是在胎盘还是在脐带组织,NSE表达的强弱在不同孕龄间没有统计学差异。3、GFAP在不同孕龄胎盘和脐带组织中均未见免疫活性。结论不同孕龄胎盘和脐带均有S100b、NSE表达,其中S100b在胎盘滋养细胞的表达随孕龄增加有增强的趋势。S100b、NSE作为围产儿缺血缺氧性脑损伤的标记物可能不具有特异性,因为胎盘和脐带中均有这些物质的释放。GFAP在各期胎盘和脐带中均均未见表达,推测GFAP可能更具有脑特异性,因此我们认为GFAP可能有希望成为围产儿缺血缺氧性脑损伤的指标。
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