EPSH在乳腺癌发生进展中的作用研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangpengjx
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
研究背景和目的EPSH蛋白是新发现的一类膜内吞转运调控蛋白,在其N端含有G-domain,里面包含了一个ATP酶结构域,可与ATP结合释放能量;在其C端含有EH-domain,是其工作的主要场所,可以参与多种细胞膜蛋白的内吞转运调控。EPSH作为EH蛋白家族的一员,除了在细胞膜参与膜蛋白内吞转运调控外,还具有核质穿梭、转录调控的功能。而乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,目前已经发展成为世界上女性发病率最高的恶性肿瘤,严重的威胁着女性健康。在我国,乳腺癌发病率不断上升,发病年龄也更加年轻化。目前乳腺癌手术、放化疗、内分泌治疗以及靶向治疗是治疗乳腺癌行之有效的方法,但乳腺癌的异质性很高,不少乳腺癌患者在治疗过程中会出现耐药,尤其是在三阴性乳腺癌中,缺乏有效的内分泌和靶向药物的治疗。因此寻找乳腺癌中切实有效的治疗靶点,仍然是目前研究的难点。而EPSH作为重要的膜转运调控蛋白,其在乳腺癌中的作用还不完全明确,本课题将主要研究EPSH在乳腺癌细胞增殖、迁移侵袭、肿瘤干性等方面的作用,并探讨其对乳腺癌患者生存预后的影响。研究方法:1.通过Western Blot验证内源性EPSH、EGFR、E-Cad在多种乳腺癌细胞中的表达情况。2.构建EPSH不同膜功能突变体的慢病毒表达质粒,感染HCC-1806、BT-549细胞。3.通过克隆形成、高内涵实时迁移及Transwell实验,探讨EPSH不同膜功能突变体对乳腺癌细胞增殖及迁移运动能力影响。4.进行干细胞微球培养实验来探讨EPSH不同膜功能突变体对乳腺癌干细胞微球形成能力的影响。5.裸鼠体内成瘤实验,检测EPSH不同膜功能突变体对HCC-1806细胞在裸鼠体内成瘤能力的影响。6.Western Blot检测EPSH蛋白在乳腺癌组织及癌旁乳腺组织中的表达情况,比较其表达水平的差异。7.免疫组化检测EPSH蛋白在乳腺癌组织及癌旁组织中的表达定位的情况。8.分析EPSH核表达、浆膜表达情况与乳腺癌临床病理参数的关系,并进一步分析EPSH与乳腺癌患者生存预后的关系,明确EPSH对乳腺癌患者无病生存期及总生存期的影响。结果:1.Western Blot对乳腺癌细胞系进行检测发现,在非三阴性乳腺癌细胞系中EPSH几乎无表达,在三阴性乳腺癌细胞系BT-549、HCC-1806中呈中等表达。2.构建EPSH不同膜功能突变体细胞系,结果表明EPSH不同膜功能突变体可以影响乳腺癌细胞的增殖,迁移,侵袭能力以及干性表型。3.动物实验验证EPSH不同膜功能突变体可以影响细胞的裸鼠成瘤能力。4.Western Blot检测发现,相比正常乳腺组织,EPSH在乳腺癌组织中表达降低。5.免疫组化结果发现,EPSH在正常乳腺组织中呈现核高表达、浆膜低表达现象,在乳腺癌组织中呈现核表达降低、浆膜表达升高的异位表达现象,且在三阴性乳腺癌中此现象更显著。6.生存分析显示,EPSH核高表达组5年DFS和OS均优于核低表达组(P=0.009,P=0.036),浆膜低表达组5年DFS优于浆膜高表达组(P=0.039)。结论:1.膜表达的EPSH可以影响乳腺肿瘤细胞增殖、侵袭迁移、干性形成和裸鼠体内成瘤能力。2.与正常乳腺组织相比,EPSH在乳腺癌组织中表达降低,并且出现核表达减少、浆膜表达增加的“异位”表达现象;EPSH异位表达影响乳腺癌患者的复发生存。
其他文献
目的:了解芜湖市某高校大一新生睡眠的现状及影响因素。探讨正念疗法对大一新生睡眠问题的影响,探索解决其睡眠问题的新方法。方法:选取芜湖市某高校大一新生723名,采用整群
根据大佛寺煤矿4#煤西部大巷掘进过程中,通过在4#煤西部大巷顶板上部煤层合理布置顶板瓦斯抽采钻孔,配合区域预抽、掘前预抽技术,对高瓦斯区域掘进工作面进行联合抽采,成功解
对多跨连续梁桥顶升施工的方法、原理、关键技术进行了研究.垫石加高顶升和截柱顶升两种方法成功应用于原北江大桥引桥的顶升施工中,保证了工程质量,工期缩短、过程顺利安全
岩性解译是遥感地质学应用的重要方向之一。岩石为矿物的集合体,受内、外动力地质作用形成不同的地形地貌,地形因子作为描述DEM数字地形曲面几何特征的定量指标参数,可用来定量化表达不同岩性所在地区地形地貌特征,进而实现基于地形因子的岩性定量分类。本文基于数学函数模拟规则数字地形表面,从岩性的地质意义角度出发,分析多个地形因子地质意义及其所描述的地形地貌特征,并建立地形因子与岩性间地质意义关联;以广西桂林
最高人民法院于2004年颁布了《最高人民法院关于审理建设工程施工合同纠纷案件若干问题的解释》(以下简称《解释一》),首次在第4条、第25条、第26条里介绍了实际施工人的概念,作为建设工程领域常见的主体,其同样也是民法中较为特殊的主体,其特别之处在于其没有建设工程施工资质,一般情况下是采取转包、分包与借用资质等方式开展工程建设,与其相关的各类合同属于无效合同。实际施工人本质上是如今城乡发展不统一的衍
近些年以来,国家积极召开关于住宅产业化即装配式建筑发展的系列重要会议,着力倡导大规模发展装配式建筑,并提出相关具体目标。装配式建筑作为一种高效快捷、绿色环保的可持