目的：全世界平均每年约有100万人死于肝癌。近年来,研究肿瘤细胞中信号转导通路的作用成为阐明肿瘤发生发展机制和寻找有效生物学治疗手段的热点。研究表明TGF-β/Smads信号异常的传导是肿瘤浸润和转移的重要因素。中医认为肿瘤的形成病机很复杂,认为痰浊内阻是肿瘤形成的病机关键。著名医学家朱丹溪在他的主要著作都列有痰门,探讨其理法方药,尤其在肿瘤的发病因素的认识上提出与痰有关。皂荚是具有“祛痰化湿、散结消肿”功效的抗肿瘤的常用中药。我们希望通过研究皂荚提取物(乙酸乙酯提取)对小鼠肝癌细胞TGF-β/Smads信号系统调控的影响,为皂荚提取物(乙酸乙酯提取)是否具有抗肝癌的作用提供参考。方法：第一部分：理论探讨1从中医理论上阐明痰和肿瘤的关系。强调痰、毒和瘀相互影响、相互转化、相互胶着是肿瘤发生和发展的关键。2提出从“痰”论治肝癌的可行性。并阐明化痰药“皂荚”具有抗癌作用的前期研究依据。第二部分：皂荚的文献研究从皂荚的一般特性研究；皂荚的历史研究探讨；含有皂荚的方剂研究；皂荚的药理学研究和皂荚的临床应用等方面阐明皂荚的特点和研究价值。第三部分：实验研究我们采用清洁级的昆明种小鼠60只。通过随机方法(随机数字表法)将实验动物分为6组,实验分为阴性对照组(吐温80溶剂)；皂荚提取物(乙酸乙酯提取)3个浓度组(26.0mg/d、13.0mg/d、7.8mg/d);阳性对照组(金龙胶囊组)；空白对照组(不造模组)。每组10只小鼠。造模采用小鼠右腋皮下接种H22肝癌细胞悬液的方法。造模后第2天到第16天,按实验分组和要求(每只灌胃量为0.4ml,已经配好浓度)进行灌胃。造模后第17天处死小鼠,收集标本进行各项检查。实验一：观察各组小鼠大体情况；各组小鼠死亡率；各组小鼠剥瘤称重,计算各组肿瘤抑制率和病理学观察。实验二：检测各组小鼠血清中的γ-谷氨酰转移酶(GGT),碱性磷酸酶(ALP),总蛋白(TP),白蛋白(ALB)和甲胎蛋白(AFP)的浓度。实验三：实时荧光定量的方法检测各组小鼠肝脏组织中的Smad4mRNA和Smad7mRNA的表达。实验四：免疫组化的方法检测Smad4和Smad7蛋白质的表达。结果：实验一：皂荚提取物对接种H22肝癌细胞荷瘤小鼠一般生物学特性和病理学的观察1鼠大体观察：空白对照组小鼠活动正常,精神状态很好,毛发正常,并且有光泽,饮食正常,大小便正常。皂荚提取物(高剂量组),皂荚提取物(中剂量组),皂荚提取物(低剂量组)和阳性对照组(金龙胶囊组),各组小鼠毛发脱落、有稀疏感、光泽度欠佳,精神不振,活动明显减少,饮食较空白对照组明显减少,饮水少较空白对照组明显减少不明显,大小便情况较空白对照组少,对外界反应慢。阴性对照组(溶剂土温80)的情况类似。右侧前肢接种H22肝癌细胞的小鼠,接种部位可见大小不等的肿块。有部分小鼠腹腔部位出现腹部胀大,用指尖触诊,有明显波动感,考虑为形成的腹水。2昆明种小鼠的死亡率达21.67%。3各组小鼠肿瘤重量比较：皂荚提取物(高)平均肿瘤重量2.87±0.34,皂荚提取物(中)平均肿瘤重量3.68±0.34,皂荚提取物(低)平均肿瘤重量3.64±0.36,阳性对照组平均肿瘤重量2.60±0.36与阴性对照组平均肿瘤重量4.73±0.40比较明显降低,P<0.01；阴性对照组,皂英提取物(中),皂荚提取物(低)与阳性对照组比较明显增高,P<0.01；皂荚提取物(高)与阳性对照组比较肿瘤重量无统计学差异,P>0.05。各组小鼠肿瘤抑制率：阳性对照组为45%；阴性对照组为0；皂荚提取物高剂量组39%；皂荚提取物中剂量组22%；皂荚提取物低剂量组为23%。4病理学观察：空白对照组小鼠肝脏的肉眼和显微镜下观察都表现正常,模型组各组小鼠总体上较空白对照组(非模型组)有更多的不正常的表现。阴性对照组,皂荚提取物中剂量组和皂荚提取物低剂量组病理学观察：肉眼大体观察：小鼠的肝脏体积较空白对照组小鼠明显增大；质地较空白对照组硬度增强；肝脏表面可见多个散在的灰白结节。阴性对照组最多,皂荚提取物中剂量组和皂荚提取物低剂量组比阴性对照组略少。光学显微镜下：肝小叶结构不清晰,肝细胞索排列不整齐。细胞核形态明显异常,肝细胞有部分细胞核增大,或核质比例增大。阳性对照组,皂荚提取物高剂量组病理学观察：肉眼大体观察：小鼠的肝脏体积较空白对照组小鼠略有增大；质地较空白对照组硬度略有增强,但不及阴性对照组；肝脏表面可以偶见散在的灰白结节。阳性对照组和皂荚提取物高剂量组没有明显差别。光学显微镜下：肝小叶结构欠清晰,肝细胞索排列不整齐。细胞核形态异常不明显。推测皂荚提取物高剂量组能通过对肝癌癌瘤有明显抑制癌细胞生长的作用,从而延缓肝癌细胞造成肝脏组织的进一步损伤,从而起到保护肝脏的目的。实验二：皂荚提取物对接种H22肝癌细胞荷瘤小鼠肝功能相关指标的影响小鼠血清GGT水平：阳性对照组平均值23±2 U／L、皂荚提取物组(高)平均值23±2 U／L与阴性对照组平均值38±2U／L比较明显降低,P<0.01；皂荚提取物组(中)平均值27±2U／L,皂荚提取物组(低)平均值37±2U／L与阴性对照组平均值比较降低P<0.05。皂荚提取物组(中)平均值,皂荚提取物组(低)平均值,阴性对照组平均值与阳性对照组平均值比较明显降低,P<0.01。小鼠血清ALP水平：阳性对照组平均值25±5 IU／L、皂荚提取物组(高)平均值34±6 IU／L、皂荚提取物组(中)平均值56±5 IU／L与阴性对照组平均值90±8 IU／L比较明显降低,P<0.01；皂荚提取物组(低)平均值75±7水平于阴性对照组比较降低P<0.05。皂荚提取物组(高)皂荚提取物组(中),皂荚提取物组(低),阴性对照组ALP水平于阳性对照组比较明显降低,P<0.01。小鼠血清TP：阳性对照组平均值70±2、皂荚提取物组(高)平均值65±6、皂荚提取物组(中)平均值59±3和皂荚提取物组(低)平均值58±3的TP水平于阴性对照组平均值47±4比较明显增高,P<0.01；。皂荚提取物组(中),皂荚提取物组(低)和阴性对照组的TP水平于阳性对照组比较明显降低,P<0.01。小鼠血清ALB：阳性对照组平均值30±2、皂荚提取物组(高)平均值29±1的小鼠ALB水平于阴性对照组平均值22±2比较明显增高,P<0.01。皂荚提取物组(中)平均值25±3,皂荚提取物组(低)平均值23±2和阴性对照组的小鼠ALB水平于阳性对照组比较明显降低,P<0.01。小鼠血清AFP：结果各组小鼠AFP的数值均没有测出。实验三：皂荚提取物对接种H22肝癌细胞荷瘤小鼠TGF-β/Smads信号转导通路smad4 mRNA和smad7 mRNA表达的影响Smad4mRNA表达：扩增倍数阳性对照组平均值0.566±0.092和皂荚提取物高剂量组平均值0.471±0.069与阴性对照组平均值0.320±0.099比较明显增高,P<0.01；皂荚提取物中剂量组平均值0.363±0.058和皂荚提取物低剂量组平均值0.280±0.067与阳性对照组比较比较明显降低,P<0.01。Smad7mRNA表达：扩增倍数阳性对照组平均值2.007±0.499、皂荚提取物组(高剂量组)平均值2.230±0.491的小鼠肝脏组织中Smad7mRNA表达水平于阴性对照组平均值3.537±0.401比较明显降低,P<0.01。皂荚提取物组(中剂量组)平均值3.106±0.410,皂荚提取物组(低剂量组)平均值3.613±0.416和阴性对照组小鼠肝组织中Smad7mRNA表达水平于阳性对照组比较明显增高,P<0.01。实验四：皂荚提取物对接种H22肝癌细胞荷瘤小鼠TGF-β/Smads信号转导通路smad4和smad7蛋白表达的影响Smad4蛋白表达：阳性对照组的小鼠肝脏Smad4蛋白表达水平平均值2973.190±248.540与阴性对照组平均值1196.399±837比较明显增高,P<0.01。皂荚提取物组(高剂量组)平均值2295.187±820.119与阴性对照组比较增高,P<0.05。阴性对照组的小鼠肝脏Smad4蛋白表达水平与阳性对照组比较明显降低,P<0.01。皂荚提取物组(中剂量组)平均值1558.835±302.801和皂荚提取物组(低剂量组)平均值988.614±338.995与阳性对照组比较降低,P<0.05。Smad7蛋白表达：阳性对照组平均值1454.381±302.405和皂荚提取物组(高剂量组)平均值1494.202±399.553的小鼠肝脏Smad7蛋白表达水平与阴性对照组平均值2239.589±272.892比较明显降低,P<0.01。皂荚提取物组(中剂量组)平均值1496.981±505.121与阴性对照组比较降低,P<0.05。阴性对照组和皂荚提取物组(低剂量组)平均值2330.056±177.105的小鼠肝脏Smad7蛋白表达水平与阳性对照组比较明显增高,P<0.01。结论：皂荚提取物(乙酸乙酯提取)的抗肝癌的作用可能有下列机理实现：①改善荷瘤小鼠的生存质量而抑制肿瘤对机体的损伤。②通过抑制接种部位肿瘤体的大小而起到抗癌的作用。③通过保护荷瘤小鼠的肝脏功能而起到保护肝脏的作用④皂荚提取物高剂量组(26.0mg／d)能通过增强Smad4mRNA的表达和下调Smad7mRNA的表达。⑤皂荚提取物高剂量组(26.0mg／d)能通过增强Smad4蛋白的表达和下调Smad7蛋白的表达。综合起到抗癌作用。