【摘 要】
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[目 的]探索花臭蛙皮肤分泌物中特定的抗氧化肽在紫外辐射方面的保护作用,有助于新型药物或化妆品的研发并为我们理解两栖动物适应环境的分子基础提供依据。[方法]用紫外辐射灯照射小鼠背部皮肤,第一周每天进行辐射,辐射剂量150mJ/cm2,第二、三周隔天辐射,辐射剂量300 mJ/cm2,每次辐射结束将样品（OS-LL11溶于ddH2O）涂抹于小鼠背部皮肤上,实验结束后取小鼠背部皮肤组织进行病理组织切片
【基金项目】
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国家自然科学基金（81760648）； 云南省应用基础研究（2018FE001（-161））；
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[目 的]探索花臭蛙皮肤分泌物中特定的抗氧化肽在紫外辐射方面的保护作用,有助于新型药物或化妆品的研发并为我们理解两栖动物适应环境的分子基础提供依据。[方法]用紫外辐射灯照射小鼠背部皮肤,第一周每天进行辐射,辐射剂量150mJ/cm2,第二、三周隔天辐射,辐射剂量300 mJ/cm2,每次辐射结束将样品（OS-LL11溶于ddH2O）涂抹于小鼠背部皮肤上,实验结束后取小鼠背部皮肤组织进行病理组织切片染色观察表皮和真皮的变化;可能的机制研究主要包括检测样品在动物和细胞水平的抗氧化活性、抗炎活性以及抗凋亡作用。抗氧化活性的检测主要包括体外自由基清除能力测试（ABTS、DPPH）以及动物和细胞水平抗氧化相关酶、活性氧和抗氧化相关蛋白表达情况的检测（SOD、GSH、NO、H2O2、LPO、MDA、CAT、LDH、ROS、Keap1、HO-1、GCLM、NQO1）;抗炎活性的检测主要包括炎性细胞因子以及免疫调节因子的检测（IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α）;抗凋亡作用的检测主要包括凋亡细胞以及凋亡相关因子的检测（TUNEL、8-OHdG、Bax、Bcl-2）.[结 果]（1）在本研究中,从花臭蛙中获得了一条抗氧化活性肽,命名为OS-LL11,在NCBI数据库进行的BLAST序列比对未发现有与之相似的氨基酸序列,是一个全新的肽,其前肽由61个氨基酸组成,从N端到C端的成熟肽序列为‘LLPPWLCPRNK’。（2）样品对实验动物表观影响方面的实验结果表明:经过OS-LL11处理过的皮肤在红斑、脱屑以及结痂方面的情况明显得到了改善;经过OS-LL11处理的小鼠背部皮肤表皮和真皮增厚的情况也得到了显著的改善。（3）可能的机制研究结果如下:OS-LL11具有直接清除ABTS自由基的能力;OS-LL11可以提升抗氧化酶的活性以及相关生化指标的水平,OS-LL11可以抑制ROS的释放,降低氧化应激相关生化指标的水平,提升抗氧化相关蛋白的表达;经过OS-LL11处理炎性细胞因子以及免疫调节因子（IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α）的水平明显出现了降低;OS-LL11下调了凋亡小体的数量,一定程度上抑制了表皮内细胞凋亡的发生,OS-LL11下调8-OHdG的水平,提升Bcl-2的水平并降低Bax的水平并且保护了细胞免受氧化应激造成的细胞凋亡从而表现出抗凋亡能力。[结论]（1）从花臭蛙的皮肤分泌物中获取了一条全新的抗氧化肽OS-LL11,成熟肽氨基酸序列‘LLPPWLCPRNK’。（2）OS-LL11可以显著改善经UVB辐射诱导的小鼠背部皮肤受损情况,并可以降低经UVB辐射导致的表皮和真皮增厚的情况。（3）OS-LL11具备体外自由基清除能力,同时也具有一定的抗氧化能力;此外OS-LL11还具有抗炎能力;最后OS-LL11具有抗凋亡的作用。
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