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目的:明确经甘草次酸修饰的半乳糖化壳聚糖纳米颗粒(GCGA NPs)在生物体内的分布及其对肝癌(HCC)细胞的靶向效率,进一步评估该纳米颗粒的细胞毒性和生物相容性。方法:遵循先前报道的两步酰胺化反应合成GACS NPs和GCGA NPs,并通过化学反应修饰异硫氰酸荧光素(FITC)。采用场发射扫描电子显微镜(FE-SEM)来观测纳米颗粒的形态和大小,用Zetasizer 3000HS仪器系统测量其粒径。通过设置体外细胞摄取实验,在共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)下观察比较三种纳米颗粒(GCGA、GACS、CS NPs)对Hep G2细胞的靶向能力以及GCGA NPs对Hep G2细胞和人正常肝细胞LO2的亲和力。以CCK-8法来测试不同浓度的GCGA NPs对Hep G2的细胞毒性。用体外溶血试验评估纳米颗粒的血液相容性。采用肝脏隧道嵌入法构建H22细胞小鼠原位肝癌模型,用FITC标记的荧光纳米颗粒溶液经尾静脉注射小鼠,以追踪不同时间点该纳米载体在生物体内的分布,进一步验证其对高表达甘草次酸(GA)和乳糖醛酸(LA)受体的肝癌组织的高靶向性。通过检测经GCGA NPs处理过的SD大鼠的体重、血常规和血生化指标,并镜下观察其主要器官的HE染色标本,来评估该纳米颗粒的生物相容性。结果:参考已报道的合成方法成功制备出GCGA、GACS、CS NPs,并标记了FITC。FE-SEM图片显示三者均呈球形,单分散性,大小均一,平均粒径约为60 nm。动态光散射(DLS)检测其平均粒径分别为93.8 nm、90.3 nm和94.0 nm。在相同条件下,来自GCGA NPs共聚焦图片荧光强度比其他两种纳米颗粒更强,并且Hep G2细胞内的绿色荧光相较于缺乏靶向受体的LO2细胞也有显著的增强。细胞毒性实验表明GCGA NPs在浓度低于50 ug/m L时对Hep G2的无明显的细胞毒性。这种纳米颗粒即使在最高浓度(300 ug/m L)下孵育红细胞3h也没有呈现出明显的溶血现象,经t检验分析可知上清液的光密度值(OD值)与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。不管是在注射后4 h还是24 h,小鼠原位肝癌模型的肿瘤组织摄取FITC-GCGA NPs的相对量是在所有组织中最高的。与阴性对照组相比,经GCGA NPs处理过的SD大鼠的体重、血常规和血生化指标在各时间点均无统计学差异(P>0.05),而且各主要器官的HE染色切片中也没有呈现出明显的病理学改变。结论:GCGA NPs是一种非常安全、有效的肝癌靶向药物载体,有望在未来肝细胞癌的靶向药物治疗领域发挥重要的作用。