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安丝菌素(ansamitocin)属于苯安莎类抗生素,具有强烈的肿瘤细胞毒性,是开发抗体药物偶联物(ADCs)的重要原料。国内安丝菌素发酵水平不高、商业供应匮乏,为我国ADC药物研发带来一定难度。将安丝菌素发酵培养、分离提取及制备进行综合考虑,以提高安丝菌素产量、降低生产成本为目标的研究,具有应用前景。医药生物技术研究所作为我国微生物药物研发机构之一,也在进行ADCs类药物的开发,并且急需稳定的安丝菌素供应。在本研究中,我们采用固体发酵珍贵束丝放线菌ATCC 31565,建立了安丝菌素发酵,提取,分离纯化的实验室制备工艺流程。首先,我们建立了适合珍贵束丝放线菌ATCC 31565稳定产生丰富孢子的种子培养基(葡萄糖：8g/L,麦芽提取物：5g/L,琼脂粉：15g/L,酵母提取物：1g/L,NaCl:5g/L)。通过摸索不同安丝菌素固体发酵培养基配方,获得了一种安丝菌素固体发酵培养基配方(葡萄糖：20g/L,玉米淀粉：30 g/L,棉籽饼粉：30g/L, CaCl2:10g/L,琼脂粉：20g/L),安丝菌素(纯度85%)产量稳定在约100mg/L,较ISP2培养基提高安丝菌素产量3倍多。在此基础上,我们对珍贵束丝放线菌ATCC 31565固体发酵培养物进行乙酸乙酯萃取和硅胶柱层析,得到含安丝菌素P-2、P-3和P-4组分的混合物。参考相关文献报道,我们对安丝菌素发酵进行了一些验证和探索。例如,在培养基中添加异丁醇,提高了安丝菌素组分P-3的相对含量,但是安丝菌素总产量未见提高。在培养基中添加缬氨酸(Val)或者稀土元素钪(ScCl3),未见安丝菌素发酵水平提高；同时,我们也进行了安丝菌素液体摇瓶发酵,效价与固体发酵相当,但液体发酵液粘稠度较高,给安丝菌素的分离提取带来了一定不便。最后,通过水解反应化脱去安丝菌素P-2,P-3,P-4中的C-3酰基侧链；采用制备型HPLC获得安丝菌素P-0纯品。安丝菌素P-0得率约82%(纯度大于99%)。提供安丝菌素样品1.5g,用于医药生物技术研究所ADCs类药物的研发,解决了我所在ADCs类药物起始研发阶段对安丝菌素的迫切需求。