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冰糖橙(Citrus sinensis Osbeck)原产湖南省洪江市,是湖南省甜橙主栽品种之一。为了进一步改善冰糖橙的品质,近年来,在冰糖橙芽变中选出了一批冰糖脐橙优良芽变(枝变)。本文对5个冰糖脐橙芽变材料和2个冰糖橙材料(对照)的主要性状进行了实地调查和理化测定,并采用AFLP技术进行了遗传分析,主要研究结果如下: 1.与普通冰糖橙比较,冰糖脐橙的果实增大,平均单果重增加,果实整齐度提高,果皮薄而光滑,呈橙黄色,肉质细嫩,化渣,果汁增多,总糖含量略低,总酸含量增高,与冰糖橙有较显著差异,风味加浓,果实品质更好。 2.用冰糖脐橙和冰糖橙对比进行AFLP分析,共筛选了40对引物,其中EcoRI AGC+MseI CGA,EcoRI AGC+MseI CAC,EcoRI AGG+Mse CAC,EcoRI AGG+MseI CCA,EcoRI ACG+MseI CAC,EcoRI ACG+MseI CCA,EcoRI AGC+MseI CTA,EcoRI ACG+MseI CAA,EcoRI ACG+MseI CTG,EcoRI AGC+MseI CTG,EcoRI AGG+MseI CCA,EcoRI ACC+MseI CGT共12对引物经PCR扩增,效果理想,共扩增出5907条带,带型清晰、丰富、可靠性强,有EcoRI AGG+MseI CAC,EcoRI ACG+MseI CAC,EcoRI ACG+MseI CAA,EcoRI ACG+MseI CTG,EcoRI AGC+MseI CTG,EcoRI AGG+MseI CCA共六对引物扩增出23条特异带。在选用EcoRI ACG+MseI CAC这对引物下,冰糖脐橙1号与普通冰糖橙对照有明显带型差异,共得到56个扩增位点,其中多态性位点6个,多态性比例达10.2%。表明冰糖脐橙的遗传物质已与冰糖橙有本质区别,首次应用AFLP技术进行柑桔芽变的分析和鉴定获得成功。 3.在叶片DNA提取过程中,改进了常规CTAB和SDS法提取叶片DNA,用NaCl和乙醚有效地去除了冰糖脐橙叶片中的多糖,获得高质量的DNA。新梢的嫩叶和成熟叶片均可作为DNA提取材料,得到高质量的DNA,A260/A280均达到了1.7-1.9,DNA纯度完全符合RFLP、RAPD、AFLP、SSR分析的要求。改变了以前只采用嫩叶作为提取材料厂摆脱了材料来源的限制和取样时间的限制。 4.对冰糖脐橙和冰糖橙的糖、酸动态变化进行了研究。在果实生长发育过程中,冰糖橙和冰糖脐橙的果汁中总糖含量均逐渐增加,7月25日至9月5日逐渐增加,9月 5日至10月历日增加趋缓,10月 15日至11月 25日又快速增加。总酸含量在7月25日至9月5日增加非常明显,从9月5日开始逐渐下降,以10月15日至11月25日果实中酸含量下降最显著,基本上达到成熟时的水平。