目的:在我国,肾细胞癌是严重威胁人民生命健康的疾病之一,是泌尿系统肿瘤中最常见的。近年来,ADM在卵巢癌、肺癌等各种恶性肿瘤的发生、发展中的作用已日益受到关注,其在肾细胞癌中的作用也已经开始受到广泛的关注与研究。肾上腺髓质素(Adrenomedullin ADM)最初是由日本学者在1993年从人嗜铬细胞瘤中分离出的一种血管舒张肽,由52个氨基酸组成,与降钙素基因相关肽(Calcitonin-gene related peptide, CGRP)间的同源性为24%,具有典型的二硫桥,属于CGRP家族。目前临床研究表明ADM在多种癌症病人中过度表达,且与组织学分级及肿瘤恶性程度呈正相关,并且与预后不良有关。其在体内可以发挥诸多复杂的生物学效应。其激活腺苷酰环化酶-PKA信号转导通路,使细胞内cAMP水平升高;提高细胞内Ca2+浓度诱导血管舒张并激活内皮细胞的一氧化氮(NO)合酶;激活MAPK信号转导通路以促进细胞有丝分裂等均可能与肿瘤的发生发展关系密切。低氧是固态肿瘤生长所具备的共同特征,低氧刺激肿瘤细胞产生一系列的反应以促进肿瘤的生长和进展。研究表明低氧可刺激ADM在组织中表达,其后又有诸多报道在低氧环境下多种肿瘤细胞中ADM过度表达。低氧环境下ADM过度表达后再发挥其生物学效应在肿瘤的生长进展过程中起着不可忽视的作用。本研究以人肾癌细胞为对象,给予相关低氧刺激处理后观测其ADM的表达水平情况,进一步在肾癌中验证低氧因素对ADM的影响。目前国内外对肾细胞癌中ADM的研究较少,因此本研究为验证并探寻肾癌的可能发生发展机制及肾癌的临床诊断和合理治疗提供理论依据。方法:1材料:人肾癌细胞株786-O,由北京协和医科大学基础研究所提供购买。2方法:培养肾癌细胞株并分别给予不同条件的低氧环境刺激,采用蛋白印迹(Western blot)检测各组肾癌细胞株中ADM的表达水平。3应用SPSS13.0软件对结果进行统计处理。ADM蛋白表达水平用独立样本T检验法或方差分析检验法。检验水准为0.05。结果:1各种条件低氧刺激中ADM蛋白表达水平βactin蛋白:分子量为42kD,Western杂交后在42kD位置出现阳性条带。采用凝胶成像分析系统对杂交条带进行半定量分析,蛋白含量以积分光密度值(IOD)表示。每次检测蛋白时均检测βactin蛋白,以其为标准对所检测ADM蛋白进行定量。ADM蛋白:分子量为7kD, Western杂交后在7kD位置出现阳性条带。采用凝胶成像分析系统对杂交条带进行半定量分析,蛋白含量以IOD表示,以相对积分光密度比较蛋白表达高低。与对照组细胞相比,各个条件低氧刺激组细胞株均有不同程度的ADM高表达,且与刺激时间呈正相关性。结论:低氧环境可以促进肾癌细胞中ADM的表达。但低氧环境促进ADM表达的具体发生机制及ADM在肾癌中的具体生物学效应仍需进一步深入探讨。